Βασικά Ένζυμα για Παραγωγή Long-RNA
Το mRNA, ως ένας τύπος RNA μακράς κωδικοποίησης, εκτελέστηκε με ασφάλεια και αποτελεσματικότητα σε ένα ευρύτερο φάσμα ατόμων κατά τη διάρκεια του COVID-19. Άλλα RNA μακράς κωδικοποίησης, όπως το αυτοενισχυόμενο RNA (saRNA) και το κυκλικό mRNA (circRNA) έδειξαν επίσης αποτελεσματικότητα σε προκλινικές και κλινικές μελέτες.
Η μεγάλης κλίμακας παραγωγή RNA μακράς κωδικοποίησης βασίζεται στην in vitro μεταγραφή (IVT) από διάφορες ενζυματικές αντιδράσεις. Τα στάδια παραγωγής RNA περιλαμβάνουν την προετοιμασία του DNA προτύπου, τη σύνθεση IVT RNA, την κυκλοφορία, την απομάκρυνση του DNA, την τροποποίηση RNA (κάλυψη και ουρά) και τον καθαρισμό RNA.
Υπάρχουν πολλά βασικά ένζυμα που χρησιμοποιούνται στη μακροχρόνια παραγωγή RNA κωδικοποίησης (π.χ. mRNA, saRNA και circRNA), συμπεριλαμβανομένων των περιοριστικών ενδονουκλεασών, της πολυμεράσης RNA T7 (T7 RNAP), του αναστολέα RNase, της ανόργανης πυροφωσφατάσης, της DNase I, του ενζύμου κάλυψης δαμαλίτιδας και της RNase R.
|
Διαδικασία
|
Ένζυμο
|
Λειτουργία
|
|
Προετοιμασία DNA προτύπου
|
Περιοριστικές ενδονουκλεάσες
|
Γραμμικοποίηση του πλασμιδικού DNA (pDNA) για την αποφυγή δημιουργίας μακρύτερου μεταγραφήματος.
|
|
Σύνθεση IVT RNA
|
Τ7 RNA πολυμεράση (T7 RNAP)
|
Συνδέονται με τον προαγωγέα Τ7 και δημιουργούν ειδικό αντίγραφο RNA. Παίξτε βασικό ρόλο κατά την αντίδραση IVT.
|
|
Αναστολέας RNase, ανασυνδυασμένος
|
Αναστέλλουν τη δραστηριότητα της RNase κατά τη διάρκεια της αντίδρασης IVT.
|
|
Πυροφωσφατάση, Ανόργανη (iPPase)
|
Αποτρέψτε το πυροφωσφορικό κατά τη διάρκεια της αντίδρασης IVT.
|
|
Αφαίρεση DNA
|
DNase I
|
Αφαιρέστε το πρότυπο DNA.
|
|
Τροποποίηση RNA
|
Ένζυμο κάλυψης δαμαλίτιδας
|
Προσθέστε δομές Cap1 στα 5' άκρα του IVT mRNA.
|
|
2'-Ο-Μεθυλοτρανσφερές
|
|
εμπλουτισμός circRNA
|
RNase R
|
Πέψτε το γραμμικό RNA και εμπλουτίστε το κυκλικό RNA.
|
Η Yaohai Bio-Pharma προσφέρει μία λύση CDMO για ένζυμα
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
ΟΧΙ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
