Η σημασία της ανάπτυξης της κατάντη διαδικασίας (DSP).
Ολόκληρος ο ζωμός ζύμωσης περιέχει πρωτεΐνη ή πλασμίδιο στόχο, καθώς και ακαθαρσίες που σχετίζονται με το προϊόν και τη διαδικασία, π.χ. συσσωματώματα, υποστρώματα μικροβιακών κυττάρων, πρωτεΐνες κυττάρων ξενιστή (HCP), DNA κυττάρου ξενιστή (HCD), ενδοτοξίνη και αντιβιοτικά.
Ως εκ τούτου, είναι ζωτικής σημασίας ο σχεδιασμός μιας αποτελεσματικής διαδικασίας καθαρισμού DSP, για την απομάκρυνση ορισμένων ακαθαρσιών και την παραγωγή εξαιρετικά καθαρής και υψηλής ποιότητας φαρμακευτικής ουσίας. Επιπλέον, η βελτιστοποίηση της διαδικασίας καθαρισμού μπορεί να βοηθήσει στην αύξηση της ανάκτησης του προϊόντος, στη μείωση του κόστους και στη βελτίωση της επεκτασιμότητας και της αναπαραγωγιμότητας της διαδικασίας.
Λέξεις-κλειδιά: ανάπτυξη διεργασίας, βελτιστοποίηση και επικύρωση, διαδικασία καθαρισμού, χρωματογραφία, απομάκρυνση ακαθαρσιών, αφαίρεση HCP, εξάλειψη HCD, αφαίρεση ενδοτοξίνης, μετουσίωση και αναδίπλωση πρωτεΐνης, συναρμολόγηση VLP, σύζευξη
Εφαρμογή: Βιοφαρμακευτική βιομηχανία, ανθρώπινη ιατρική, ιατρική ζώων, εμβόλιο, ανασυνδυασμένα βιολογικά προϊόντα μεγάλου μορίου, ανασυνδυασμένα βιολογικά, βιολογικό αντιδραστήριο
DSP Solutions της Yaohai Bio-Pharma
Έχουμε μεγάλη εμπειρία στην απομόνωση πρωτεϊνών-στόχων ή πλασμιδίων από πολύπλοκες μήτρες, αναπτύσσοντας και βελτιστοποιώντας τη διαδικασία καθαρισμού κατάντη. Υπάρχουν διάφοροι τύποι λειτουργιών μονάδων κατάλληλων για τον καθαρισμό βιολογικών ουσιών, συμπεριλαμβανομένης της φυγοκέντρησης, της διήθησης, της ομογενοποίησης, της αλκαλικής λύσης, της υπερδιήθησης, της κατακρήμνισης, της μετουσίωσης και της αναδίπλωσης πρωτεΐνης, της χρωματογραφίας κ.λπ.
Οι διαθέσιμες υπηρεσίες ανάπτυξης καθαρισμού μας περιλαμβάνουν:
- Ανάπτυξη ολόκληρης της διαδικασίας καθαρισμού από τη συλλογή κυττάρων ή υπερκειμένου έως το τελικό δραστικό συστατικό.
- Βελτιστοποίηση της διαδικασίας καθαρισμού με βάση ακαθαρσίες που σχετίζονται με το προϊόν και τη διαδικασία για την αύξηση της ποιότητας και της ασφάλειας του προϊόντος, π.χ. HCP, HCD, ενδοτοξίνη.
- Ορισμός και βελτιστοποίηση βασικών παραμέτρων σε μία ή περισσότερες λειτουργίες μονάδας, συμπεριλαμβανομένης της κυτταρικής λύσης, της διήθησης εφαπτομενικής ροής, της διαλογής ρητίνης, της χρωματογραφίας, της μετουσίωσης και της αναδίπλωσης πρωτεΐνης κ.λπ.
- Βελτιστοποίηση της διαδικασίας όσον αφορά την ποιότητα, την απόδοση, την ανάκτηση, το κόστος και την επεκτασιμότητα.
- Επικύρωση της κατάντη διαδικασίας καθαρισμού.
- Αξιολόγηση εύρους παραμέτρων βάσει κινδύνου και Σχεδιασμός Πειραμάτων (DoE) στη μοντελοποίηση διεργασιών.
Λεπτομέρειες υπηρεσιών
Οι τυποποιημένες πλατφόρμες καθαρισμού πρωτεΐνης ή πλασμιδίου βασίζονται σε πολλαπλά στάδια ακατέργαστου καθαρισμού και σε λιγότερα από 4 στάδια χρωματογραφίας, συμπεριλαμβανομένης της σύλληψης, του ενδιάμεσου καθαρισμού και της στίλβωσης.
| Λεπτομέρειες υπηρεσιών |
Λειτουργίες Μονάδας |
παράμετροι |
| Ακατέργαστος Καθαρισμός |
Φυγοκέντρηση |
Ταχύτητα περιστροφής, Χρόνος |
| Ομογενοποίηση υψηλής πίεσης |
Συνολικό Στερεό Περιεχόμενο, Πίεση, Κύκλοι |
| Συνεχής Αλκαλική Λύση |
Η αναλογία των επαναιωρημένων κυττάρων προς το διάλυμα λύσης, χρόνος λύσης |
| Διήθηση εφαπτομενικής ροής |
Υλικό μεμβράνης και μέγεθος πόρων, Ρυθμός ροής τροφοδοσίας Διαμεμβρανική πίεση (TMP), λόγος όγκου διηθήματος προς περιοχή μεμβράνης |
| Κατακρήμνιση |
Τύπος και συγκέντρωση κατακρημνιστικού, πρόσθετο, pH, θερμοκρασία, χρόνος |
| Μετουσίωσης και Αναδίπλωση |
Διαλυτοποίηση πρωτεϊνών σώματος εγκλεισμού |
Συγκέντρωση μετουσιωτικών (π.χ. ουρία, HCl γουανιδίνη, ισχυρό ιοντικό απορρυπαντικό), απορρυπαντικά (π.χ. δωδεκυλοθειικό νάτριο, SDS), αναγωγικοί παράγοντες (π.χ. διθειοθρεϊτόλη, DTT), χηλικοί παράγοντες (αιθυλενοδιαμινοτετραοξικό οξύ, EDTA), θερμοκρασία, θερμοκρασία, |
| Αναδίπλωση πρωτεΐνης |
Μέθοδοι αναδίπλωσης (αραίωση, αιμοκάθαρση ή αναδίπλωση SEC), συγκεντρώσεις πρωτεϊνών, ρυθμιστικά διαλύματα, pH, θερμοκρασία, χρόνος, οξειδωτικοί και αναγωγικοί παράγοντες (π.χ. γλουταθειόνη, GSH/οξειδωμένη γλουταθειόνη, GSSH, DTT/GSSH, κυστεΐνη/κυστίνη), πρόσθετα Small (L-αργινίνη, Ουρία, Γουανιδίνη/HCl και απορρυπαντικά) |
| Σύλληψη, ενδιάμεσος καθαρισμός και στίλβωση |
AC (Χρωματογραφία συγγένειας) |
Διάφοροι τύποι ρητίνης/στήλης χρωματογραφίας (π.χ. AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), μήκος και διάμετρος στήλης, σύνθεση ρυθμιστικού διαλύματος, όγκος έγχυσης, σύνθεση κινητής φάσης (προσρόφηση και εκρόφηση), pH, ρυθμός ροής, δέσμευση, Συνθήκες πλύσης και έκλουσης. |
| IEX (Χρωματογραφία ανταλλαγής ανιόντων ή κατιόντων) |
| HIC (Χρωματογραφία Υδροφοβικής Αλληλεπίδρασης) |
| Αφαλάτωση ή/και χρωματογραφία αποκλεισμού μεγέθους (SEC) |
| RPC (Χρωματογραφία ανάστροφης φάσης) |
| MMC, Χρωματογραφία μικτού τρόπου |
Μελέτη περίπτωσης
Υπόθεση 1
Μας ανατέθηκε να αναπτύξουμε και να βελτιστοποιήσουμε τη διαδικασία καθαρισμού κατάντη για να αυξήσουμε την καθαρότητα της πρωτεΐνης από 85% σε 90% μειώνοντας παράλληλα τα βήματα χρωματογραφίας.
Ο Yaohai παρέδωσε μια ισχυρή και κλιμακούμενη διαδικασία καθαρισμού με 3 βήματα χρωματογραφίας για την πρωτεΐνη-στόχο, μια βακτηριακή αλλεργία. Και η τελική καθαρότητα έφτασε το 95%.
Υπόθεση 2
Ο Yaohai διορίστηκε από τον πελάτη μας για να βελτιστοποιήσει τη διαδικασία αφαίρεσης ενδοτοξίνης του εμβολίου με σωματίδια τύπου ιού (VLP).
Η ομάδα μας πραγματοποίησε βελτιστοποίηση παραμέτρων χρωματογραφίας και παρασκεύασε μια φαρμακευτική ουσία με καθαρότητα 98% και κατάλοιπο ενδοτοξίνης 12.8EU/mg.
Οι εμπειρίες μας
- Έχουμε συμμετάσχει στην ανάπτυξη και την κατασκευή διαφόρων μεγάλων μορίων, συμπεριλαμβανομένων εμβολίων ανασυνδυασμένης υπομονάδας, VLPs, ορμονών (ινσουλίνη, GLP-1, αυξητική ορμόνη), κυτοκινών (Ιντερλευκίνη-2/IL-2, IL-15, IL-21 ), αυξητικούς παράγοντες (EGF, FGF, NGF), νανοσώματα/αντισώματα ενός τομέα (sdAbs), ένζυμα κ.λπ.
Εξοπλισμός
Χρησιμοποιούμε κορυφαία στον κλάδο συστήματα AKTA Pure, AKTA Avant και Preparative HPLC για την εκτέλεση διαφόρων μεθόδων χρωματογραφίας, συμπεριλαμβανομένων της χρωματογραφίας συγγένειας, ανταλλαγής ιόντων, υδρόφοβης αλληλεπίδρασης, ανάστροφης φάσης και χρωματογραφίας αποκλεισμού μεγέθους.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
ΟΧΙ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
