Ορισμός Μοριακού Βάρους με LC-MS
Το ακέραιο μοριακό βάρος έχει πάντα αναγνωριστεί ως σημαντική παράμετρος των βιολογικών φαρμάκων. Η ανάλυση του ακέραιου μοριακού βάρους χρησιμοποιείται για να δείξει τα προϊόντα πρωτεΐνων/πεπτίδων και να επαληθεύσει τα βιολογικά φάρμακα. Η μέτρηση του μοριακού βάρους είναι απαίτηση των κανονιστικών κατευθυντήριων γραμμών.
Η Yaohai Bio-Pharma προσφέρει ανάλυση ακέραιου μοριακού βάρους υπό φυσιολογικές, μειωμένες και N-απογλυκοσυλημένες συνθήκες. Χρησιμοποιούμε Υγρή Χρωματογράφηση - Σφαιρική Μάζα (LC-MS) για να καθορίσουμε το ακέραιο μοριακό βάρος.
Κανονιστικές Απαιτήσεις για το Μοριακό Βάρος
Στο ICH Q6 προτείνεται ότι «το μοριακό βάρος (ή μέγεθος) καθορίζεται με χρήση χρωματογράφησης αποκλειστικής μεγέθους, ηλεκτροφόρησης σε αγγείο SDS-polyacrylamide (υπό μειωμένες και μη μειωμένες συνθήκες), σφαιρικής μάζας (MS) και άλλων κατάλληλων τεχνικών».
Αναλυτικές Μεθόδοι
| Ανάλυση |
Μέθοδοι |
| Μοριακό βάρος |
LC-MS / Υγραία Χρωματογράφηση/Ηλεκτροσπλαχνική Μαζική Σπεκτρομετρία (LC/ES-MS) για φυσικά, μειωμένα, N-απογλυκοσυλωμένα πρωτεΐνα ή υπομονάδες |
Αναλυτικές Διαδικασίες
Ολοκληρωμένος Μοριακός Βάρος:
- Εκτέλεση LC-MS στο φυσικό δείγμα όπως παραδόθηκε.
- Ανάλυση δεδομένων LC-MS.
Μειωμένος Μοριακός Βάρος:
- Αναμειξη του δείγματος πρωτεΐνας με κατάλληλο μειωτικό ουσία;
- Εκτέλεση LC-MS στη μειωμένη πρωτεΐνη;
- Ανάλυση δεδομένων LC-MS.
N-απογλυκοσυλωμένος Μοριακός Βάρος:
- Αφαίρεση των N-γλυκάνιων με κατάλληλο ένζυμο;
- Εκτέλεση LC-MS στο Ν-απογλυκοσυλοποιημένο πρωτεΐνη;
- Ανάλυση δεδομένων LC-MS.
Μειωμένο και Ν-απογλυκοσυλοποιημένο μοριακό βάρος:
- Αναμειξη του δείγματος πρωτεΐνας με κατάλληλο μειωτικό ουσία;
- Αφαίρεση των N-γλυκάνιων με κατάλληλο ένζυμο;
- Εκτέλεση LC-MS σε μειωμένη και Ν-απογλυκοσυλοποιημένη πρωτεΐνη;
- Ανάλυση δεδομένων LC-MS.
Μοριακό βάρος υπομονάδας πρωτεΐνης:
- Διακοπή υπομονάδας
- Εκτέλεση LC-MS στην υπομονάδα πρωτεΐνης
- Ανάλυση δεδομένων LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
