Η Σημασία της Επιλογής Στελέχους
Η επιλογή κατάλληλων φιλοξενών είναι απαραίτητη για την ανάπτυξη CMC βιολογικών προϊόντων, κάτι που καθορίζει την ποιότητα και την ομοιογένεια του προϊόντος και της διαδικασίας κατασκευής. Το άμεσο στόχος της επιλογής των φιλοξενών είναι να παρέχει μια υποψήφια πρωταρχική τράπεζα κυττάρων (PCB), με υψηλά επίπεδα εκφώνησης και υψηλή σταθερότητα σε όσον αφορά τη σταθερότητα μετάδοσης και τη σταθερότητα αποθήκευσης. Η επιλογή κατάλληλων φιλοξενών είναι απαραίτητη για δύο κύριους λόγους:
- Πρώτον, να επιλεγεί το μικροβιακό φιλοξενό με υψηλό επίπεδο εκφώνησης. Υπάρχουν πολλά εμπορικά διαθέσιμα στελέχη, που χρησιμοποιούνται για την εκφώνηση διαφόρων τύπων πρωτεΐνων, όπως δηλητηριώδων πρωτεΐνων, λύσιμων πρωτεΐνων ή ευκαρυωτικών πρωτεΐνων.
- Δεύτερον, να θερμαίνουμε τον φιλοξενού με γενετική σταθερότητα. Η δοκιμασία γενετικής σταθερότητας είναι κλειδιά κυβερνητής κατά τη διάρκεια του βιωτικού κύκλου παραγωγής. Προτείνεται ότι υψηλή γενετική σταθερότητα αναγνωρίζεται ως άλλη κλειδιά χαρακτηριστική για τον κατάλληλο στρατιώτη.
Λέξεις-κλειδιά: επιλογή μικροβιακού στρατιώτη, έλεγχος μικροβιακού στρατιώτη, υψηλής διάθεσης έλεγχος των βακτηρίων ή μάνης, επιλογή υψηλής παραγωγής στρατιώτη, έλεγχος υψηλής σταθερότητας στρατιώτη, έλεγχος γενετικά σταθερού στρατιώτη Εφαρμογή: ανθρώπινη φαρμακευτική, φαρμακευτική ζώων, εμβολία, συνθετική βιολογία, αναπαραγωγικά μεγάλων μορίων βιολογικών, βιολογικός ύλος
Υπηρεσίες Έλεγχου Στρατιώτη της Yaohai Bio-Pharma
Εφιστάμενοι πάνω από 10 χρόνια εμπειρίας σε CDMO στα μικροβιακά βιολογικά, υποστηρίζουμε την ανάπτυξη και την παραγωγή διάφορων μεγάλων μορίων, συμπεριλαμβανομένων των αναδρομικών υπομονάδων εμβολίων, των παρεμφερόντων ιού (VLP), των ormονών (insulin, GLP-1, growth hormone), των κυτοκινινών (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), των μεγαθυμητικών παραγόντων (EGF, FGF, NGF), των nanobodies/Single-domain antibodies (sdAbs), των ενζυμάτων, κλπ.
Έχουμε συγκεντρώσει πλούσιες εμπειρίες στην επιλογή διαφόρων τύπων πλάσμιδων φορτίων και μικροβιακών φορέων, συμπεριλαμβανομένων των βακτηρίων Escherichia coli (E. coli), και ζύμης Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Μπορούμε να βρούμε το καλύτερο σύστημα έκφρασης για τα ειδικά σας βιολογικά.
Συλλέξαμε διάφορους μικροβιακούς φορείς με σαφείς πηγές και πρότυπο CoA, συμπεριλαμβανομένων E.Coli της έκφρασης και της έκφρασης μάγειρας.
Λεπτομέρειες Υπηρεσίας
|
Υπηρεσίες
|
Λεπτομέρειες Υπηρεσίας
|
Ελάχιστος χρονικός πίνακας/Ημέρα
|
Αποτελέσματα
|
|
Δημιουργία φυλής (E. coli)
|
Μετατροπή πλάσμιδων (πολλαπλοί ξενιστές)
|
5
|
Πιστοποιητικό ποιότητας εμπορικών ξενιστών Αναφορά δημιουργίας φυλής
|
|
Επαλήθευση PCR
|
|
Καθαρισμός φυλής
|
|
Διαφύλαξη φυλής
|
|
Δημιουργία φυλής (μάγευρα)
|
Παρασκευή ικανών κυττάρων μάγευρας
|
10
|
|
Γραμμικοποίηση πλάσμιδων
|
|
Ηλεκτρομετασχηματισμός
|
|
Επιλογή αντιστάσεως/Έλεγχος ιδιοτροφίας
|
|
Καθαρισμός φυλής
|
|
Διαφύλαξη φυλής
|
|
Επιλογή κατάλληλου φιλοξενού
|
Εξαγωγή DNA πλάσματος ή Γονιδιακού DNA
|
15-20
|
Διαδικασία επιλογής φιλοξενού COA για μηχανικά κατασκευασμένα στρατιώματα
|
|
Επαλήθευση PCR, χαρακώσεις περιοριστικών ενζύμων
|
|
Ακολουθία στόχιου γονιδίου
|
|
Επιλογή φιλοξενών με υψηλή έκφραση
|
|
Επιλογή φιλοξενών με γενετική σταθερότητα
|
|
Διαφύλαξη φυλής
|
Μελέτη περιπτώσεων
Ένας κατάλληλος φιλοξενός βελτιώνει το επίπεδο έκφρασης πρωτεΐνης κατά 2,5 φορές.
Εντολεύμαστε να αναπτύξουμε υψηλή παραγωγικότητα E. coli γονίδιο. Και δοκιμάσαμε τρεις τύπους εμπορικών E. coli φορέων, με βάση τις χαρακτηριστικές του στόχου πρωτεΐνης. Εμφανίστηκε ότι το γονίδιο S1-1 και S1-2 (Σχήμα Α: Σειρά 1,2) βελτίωσε το επίπεδο πρωτεΐνης κατά 3,5 φορές από το αρχικό γονίδιο του πελάτη (Σχήμα Α: Σειρά 3).
Επιπλέον, το γονίδιο S1-1 παρουσίασε υψηλή γενετική σταθερότητα (Σχήμα Β), και αναγνωρίστηκε ως υποψήφιο γονίδιο για την αρχική τράπεζα κυττάρων (PCB).
Χαρακτηριστικά της Υπηρεσίας Μας
Αποδεικνύεται ειδικότητα με διάφορους μικροβιακούς φορείς, π.χ., E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae και H. polymorpha .
Έχουμε εμπειρία σε E. coli εκτόξευση στο περιπλάσμα, ανάλυση διαλύσιμων και σωματιδίων περιλήψεων, καθώς και εκτόξευση μέσα στο μαγιανό ή εκτόξευση από το μαγιανό. Δεν προσθέτουμε αντιβιοτικά ή τα προσθέτουμε με βάση την ρυθμιστική καθοδήγηση.
Δημιουργούμε μια πλατφόρμα υψηλής διάβροξης για να επιλέξουμε φυλάκια με υψηλή παραγωγικότητα και σταθερότητα από πάνω από εκατό υποψήφια φυλάκια.
Εγγυάται ότι ο προσανατολισμός και η επιλογή των φυλάκιων είναι αναζητήσιμοι, υπό την Καλή Διαχείριση Δεδομένων και Εγγραφών.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
