Πρωτεάσες αφαίρεσης ετικέτας
Για να βελτιώσουν τη διαλυτότητα και να απλοποιήσουν τη διαδικασία καθαρισμού των ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών, οι ερευνητές συνήθως προσθέτουν ετικέτες σύντηξης, από τις οποίες χρησιμοποιούνται συνήθως His-tag, πρωτεΐνη δέσμευσης μαλτόζης (MBP) και γλουταθειόνη-S-τρανσφεράση (GST).
Αν και επισημαίνεται ως μια επιπλέον αλληλουχία πρωτεΐνης, θα πρέπει να αφαιρεθεί για να διατηρηθεί η βιολογική δραστηριότητα στη φαρμακευτική βιομηχανία. Η αφαίρεση των ετικετών σύντηξης απαιτεί πρωτεάσες ειδικής τοποθεσίας, όπως εντεροκινάση (EK), θρομβίνη, πρωτεάση του ιού etch του καπνού (TEVp), πρωτεάση ανθρώπινου ρινοϊού 3C (HRV3C), πρωτεάση μικρής πρωτεΐνης τροποποίησης ουβικιτίνης (SUMO), ιός στίγματος φλεβών καπνού ( TVMV) πρωτεάση και καρβοξυπεπτιδάση Α/Β (CPA/CPB).
Χαρακτηριστικά
|
Ένζυμο
|
Ιστότοπος αναγνώρισης
|
Ενδοπρωτεάσες αφαίρεσης ετικέτας
|
Εντεροκινάση (ΕΚ), Εντεροπεπτιδάση
|
DDDDK↓
|
Θρομβίνη
|
LVPR↓GS
|
TEV πρωτεάση
|
ENLYFQ↓G
|
Πρωτεάση HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
Πρωτεάση SUMO
|
Τριτοβάθμια δομή SUMO
|
TVMV πρωτεάση
|
ETVRFQG↓S
|
Εξωπρωτεάσες αφαίρεσης ετικέτας
|
Καρβοξυπεπτιδάση Α (CPA)
|
C-τερματικά αμινοξέα, εκτός από τα Pro, Lys και Arg
|
Καρβοξυπεπτιδάση Β (CPB)
|
C-τελικό Lys και Arg
|
Άλλες πρωτεάσες
Εφαρμογή
|
Ένζυμο
|
Λειτουργία
|
Άλλες πρωτεάσες
|
Πρωτεάση Κ
|
Μια πρωτεάση σερίνης που αφομοιώνει τις πρωτεΐνες υδρολύοντας πεπτιδικούς δεσμούς.
|
IdeS, IgG πρωτεάση
|
Ένζυμα αποικοδόμησης IgG (Ides) που διασπώνται σε μια συγκεκριμένη θέση της ανοσοσφαιρίνης G (IgG), δημιουργώντας θραύσματα Fab και Fc
|
IgA1 πρωτεάση
|
Ένα πρωτεολυτικό ένζυμο που διασπά συγκεκριμένη θέση στην αλληλουχία της περιοχής άρθρωσης της ανθρώπινης ανοσοσφαιρίνης Α1 (IgA1).
|
Νουκλεάση
Εφαρμογή
|
Ένζυμο
|
Λειτουργία
|
Νουκλεάση
|
Νουκλεάση
|
Διασπά τα νουκλεϊκά οξέα (DNA ή RNA) υδρολύοντας τους φωσφοδιεστερικούς δεσμούς.
|
Περιορίστε το ένζυμο
|
Μια ενδονουκλεάση που διασπά το DNA σε ή κοντά σε συγκεκριμένες θέσεις.
|
Αμιδάση
Εφαρμογή
|
Ένζυμο
|
Λειτουργία
|
Αμιδάση
|
PNGase F
|
Σχίζει μεταξύ των πιο εσωτερικών υπολειμμάτων GlcNAc και ασπαραγίνης με υψηλή περιεκτικότητα σε μαννόζη, υβριδικούς και σύνθετους ολιγοσακχαρίτες.
|
Η Yaohai Bio-Pharma προσφέρει διάλυμα CDMO μίας στάσης για ενζυμικό αντιδραστήριο