Κλειδιά ένζυμα για τη παραγωγή μεγάλου RNA
Το mRNA, ως είδος μεγάλου κωδικού RNA, λειτουργούσε ασφαλώς και αποτελεσματικά σε μεγαλύτερο φάσμα ανθρώπων κατά τη διάρκεια της COVID-19.Άλλα μεγάλα κωδικού RNA, όπως το αυτοαύξησιμο RNA (saRNA) και το κυκλικό mRNA (circRNA), επίσης επέδειξαν αποτελεσματικότητα σε προ-κλινικές και κλινικές μελέτες.
Η μεγάλη κλίμακα παραγωγής μεγάλου κωδικού RNA βασίζεται στην εκτός οργανισμού μεταφορά (IVT) με διάφορες ενζυματικές αντιδράσεις. Οι βήματα παραγωγής RNA περιλαμβάνουν την παρασκευή προτύπου DNA, τη σύνθεση IVT RNA, την κυκλοφορία, την αφαίρεση DNA, την τροποποίηση RNA (κάπινγκ και τέιλινγκ) και την καθαρισμό RNA.
Υπάρχουν διάφορα κλειδιά ένζυμα που χρησιμοποιούνται στην παραγωγή μεγάλου κωδικού RNA (π.χ., mRNA, saRNA και circRNA), συμπεριλαμβανομένων των επαγγελματικών ενδονεκλεασών, του πολυμεράση T7 RNA (T7 RNAP), του ινιβιτόρα RNase, του ανοργανικού πυροφοσφατάση, του DNase I, του ενζυματικού κάπινγκ vaccinia και του RNase R.
|
Διαδικασία
|
Ένζυμο
|
Λειτουργία
|
|
Παρασκευή προτύπου DNA
|
Ενδοπυρηνικές περιοχές
|
Γραμμικοποίηση πλάσμιδ DNA (pDNA) για να μην δημιουργούνται μεγαλύτερα μεταφορικά.
|
|
Σύνθεση RNA με την IVT
|
Πολυμεράσα RNA τύπου T7 (T7 RNAP)
|
Να συνδέονται με τον προωθητή T7 και να δημιουργούν συγκεκριμένο μεταγγισμό RNA. Να έχουν κεντρικό ρόλο κατά τη διάρκεια της αντίδρασης IVT.
|
|
Συντονιστής RNase, ανασυνδυασμένος
|
Αποτρέπουν τη δραστηριότητα της RNase κατά τη διάρκεια της αντίδρασης IVT.
|
|
Πυροφοσφατάση, άοργανικη (iPPase)
|
Αποτρέπουν την πυροφοσφορική κατά την αντίδραση IVT.
|
|
Αφαίρεση DNA
|
DNase I
|
Αφαιρέστε το πρότυπο DNA.
|
|
Τροποποίηση RNA
|
Ενζυμα κάλυψης Vaccinia
|
Προσθέστε δομές Cap1 στα 5′ άκρα του IVT mRNA.
|
|
2’-O-Methyltransferase
|
| εξαγωγή circRNA |
Επικαιροποίηση |
Χημείωση γραμμικού RNA και εξαγωγή κυκλικού RNA. |
Το Yaohai Bio-Pharma προσφέρει ολοκληρωμένη λύση CDMO για ένζυμα
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
