I fremstillingsprocessen for in vitro transkription (IVT) mRNA kræves lineariseret plasmid DNA som transkriptionsskabelon for IVT ved hjælp af T7 RNA polymerase. Plasmid-DNA af høj kvalitet er afgørende for in vitro-transskription.
Baseret på den modne plasmidpræparationsserviceplatform kan Yaohai Bio-Pharma tilbyde en lineariseret plasmid-DNA-præparationsservice af høj renhed og høj standard for at opnå effektiv IVT-transkription.
Tjenester detaljer
| Proces | Valgfri service | Service detaljer | Leveringsperiode (hverdag) |
| Cirkulært plasmidpræparat | Gensyntese | Gensyntese (tredjepart) | 7-10 |
| Plasmidamplifikation | Plasmidamplifikation | 2 |
| Plasmidekstraktion |
| Lineariseret plasmidpræparation | Plasmid linearisering og oprensning | Plasmid linearisering | 1 |
| Linearisering DNA-oprensning |
| Plasmid DNA kvalitetskontrol | Koncentration renhed | Ultraviolet (UV) spektrofotometri | 1-2 |
| Plasmidkonformation | Agarosegelelektroforese (AGE) |
| Kapillær elektroforese (CE) - valgfri |
| Plasmididentifikation | Restriktionsenzym identifikation/ AGE |
Vores egenskaber
Fleksibelt valg af lineariseringsmetoder
Optimering af DNA-ekstraktion og oprensningsmetoder for at opnå høje genvindingsrater.
Strenge proceskontrolstandarder med en superhelisk konformationshastighed af plasmidprøver til forskning på over 80 %.
Høj standard og høj effektivitet plasmid forberedelse og kvalitetskontrol tjenester til at imødekomme eksperimentelle behov.
Case study
Tager man Yaohai Bio-Pharma katalog mRNA_luciferase produkt som et eksempel, har transkriptionsskabelonplasmidprøven (forskningskvalitet) et superhelical ratio på mere end 90%, et lineariseringsforhold tæt på 100% og et efterfølgende transkriptionsforhold op til 1:200 ( lineariseret plasmid DNA:mRNA).
mRNA_luciferasen opnået ved fremstilling af et lineariseret plasmid som skabelon transficeres ind i 293T-celler, og enzym-substrat-reaktionsaktiviteten evalueres 24 timer efter transfektion.
Et åbenlyst stærkt luciferaseaktivitetssignal kan påvises, dvs. luciferaseproteinet udtrykkes effektivt, hvilket tyder på, at renheden af transkriptionsskabelonen fuldt ud kan opfylde kravet om mRNA-præparation af høj kvalitet.
Supercoiled Plasmid Ratio Assay
Validering af luciferase-mRNA-ekspression in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
