CircRNA-præparation kræver lineært RNA som precursormateriale (RNA-precursor) til ringslutning, hvor RNA-precursoren sædvanligvis fremstilles under anvendelse af lineariseret plasmid-DNA som en transkriptionsskabelon og transskriberes in vitro ved hjælp af T7 RNA-polymerase.
Plasmid-DNA af høj kvalitet er afgørende for in vitro-transkription (IVT). Baseret på den modne plasmidpræparationsserviceplatform kan Yaohai Bio-Pharma levere en høj renhed og standard lineariseret plasmid DNA (pDNA) præparationsservice for at sikre integriteten af IVT-produkter.
Tjenester detaljer
| Proces | Valgfri service | Service detaljer | Leveringsperiode (hverdag) |
| Cirkulært plasmidpræparat | Gensyntese | Gensyntese (tredjepart) | 7-10 |
| Plasmidamplifikation | Plasmidamplifikation | 2 |
| Plasmidekstraktion |
| Lineariseret plasmidpræparation | Plasmid linearisering og oprensning | Plasmid linearisering | 1 |
| Linearisering DNA-oprensning |
| Plasmid DNA kvalitetskontrol | Koncentration renhed | Ultraviolet (UV) spektrofotometri | 1-2 |
| Plasmidkonformation | Agarosegelelektroforese (AGE) |
| Kapillær elektroforese (CE) - valgfri |
| Plasmididentifikation | Restriktionsenzym identifikation/ AGE |
Vores egenskaber
Fleksibelt valg af lineariseringsmetoder
Optimering af DNA-ekstraktion og oprensningsmetoder for at opnå høje genvindingsrater.
Strenge proceskontrolstandarder med en superhelisk konformationshastighed af plasmidprøver til forskning på over 80 %.
Høj standard og høj effektivitet plasmid forberedelse og kvalitetskontrol tjenester til at imødekomme eksperimentelle behov.
Case study
Tager man Yaohai Bio-Pharmas produkt mCherry circRNA som et eksempel, er det supercoilede forhold mellem transkriptionsskabelonplasmidprøver (forskningskvalitet) mere end 70%, med en lineariseringshastighed på tæt på 100%.
mCherry circRNA fremstilles med lineariseret plasmid som skabelon og transficeres ind i 293T-celler. Højt niveau af fluorescensekspression (rød fluorescens) detekteres efter 24 timers transfektion, hvilket vil blive forstærket efter 48 timer og stadig kan detekteres på den 7. dag og den 14. dag efter transfektion.
mCherry-protein udtrykkes stabilt og effektivt, og den transkriptionelle skabelonrenhed kan opfylde kravet om circRNA-lægemiddelprodukt (DP) med høj kvalitet.
In vitro ekspressionsvalidering af mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
