I forarbejdsprocessen for in vitro transkription (IVT) mRNA kræves lineariseret plasmid-DNA som transkriptionsmal for IVT med hjælp fra T7 RNA polymerase. Høj kvalitet på plasmid-DNA er afgørende for in vitro transkription.
På baggrund af den modne plasmidforberedelseserviceplatform kan Yaohai Bio-Pharma tilbyde en service til forberedelse af lineariseret plasmid-DNA af høj renehed og høj standard for at opnå effektiv IVT-transkription.
Tjenesteoplysninger
| Proces |
Valgfrit Tjenesteudbud |
Servicedetaljer |
Leveringsperiode (arbejdsdag) |
| Forberedelse af cirkulære plasmider |
Genetisk syntese |
GeneSyntese (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidforstærkning |
Plasmidforstærkning |
2 |
| Plasmidudtrækning |
| Forarbejdning af lineære plasmider |
Plasmidlinearisering og -rensering |
Plasmidlinearisering |
1 |
| Lineariseret DNA-reneffektivering |
| Kvalitetskontrol af plasmid-DNA |
Koncentration hensyn |
Ultraviolet (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmidkonformation |
Agarose gelelektrofores (AGE) |
| Kapillær_elektrofores (CE) - Valgfri |
| Plasmididentifikation |
Restriktionsenzyme identifikation/AGE |
Vores træk
Flexible valg af lineariseringsmetoder
Optimering af metoderne for DNA-udtrækning og -rensnings for at opnå høje genskabsrater.
Strikte proceskontrolstandarder, med en superhelikal konformationsrate på plasmidprøver til forskning på over 80%.
- Modeneret Platform Proces
Høj standard og effektiv plasmidforberedning og kvalitetskontroltjenester for at opfylde eksperimentelle behov.
Case studie
Ved brug af Yaohai Bio-Pharma katalogprodukt mRNA_luciferase som eksempel har transskriptionstemplateplasmidprøven (forskningsgrad) en superhelikal andel på mere end 90%, en lineariseringsandel tæt på 100% og en efterfølgende transskriptionsandel op imod 1:200 (lineariseret plasmid DNA:mRNA).
MRNA_luciferase, der opnås ved forberedelsen af en lineariseret plasmid som skabelon, transfekteres ind i 293T-celler, og enzym-substrate reaktionsaktiviteten vurderes 24 timer efter transfektion.
En tydelig stærk luciferaseaktivitetsignal kan detekteres, dvs. at luciferaseprotein udtrykkes effektivt, hvilket antyder, at renheden af transskriptionsskabelonen fuldt ud kan tilfredsstille kravene for forberedelse af høj-kvalitets mRNA.
Analyse af supertrukket plasmidforhold
Verifikation af luciferase mRNA-udtryk In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
