Grundlaget for indkapsling er design og udvikling af leverance-systemet. Et godt design på leverance-systemet gør det muligt for circRNA-molekyler at komme ind i kroppen uden at blive nedbrydt af RNA-enzymers og derefter effektivt leveres til målstaden, krydse cellemembranen og frigives intracellulært.
Lipidnanopartikler (LNPs) er det bedste leverance-system der er tilgængeligt, med fordele vedrørende indkapsling, in vivo-udtryk og in vivo-sikkerhed sammenlignet med andre leverance-systemer. LNPs med nucleinsyrefragmenter bliver let svoret ind i celler og danner intracellulære legemer. Når de kommer ind i cellen, protonerer den syreholdige miljø i intracellulære legemer og lader hovedet på ioniserede lipid positively belægget, hvilket resulterer i fusion med det indre membran af intracellulære legemer og frigiver det målrettede nucleinsyre ind i cellen til virkningsfuld handling.
Yaohai Bio-Pharma circRNA service udvikler sig stadig og kan tilbyde circRNA-LNP indkapslingservice til at optimere relevante kritiske procesparametre og forbedre konsekvensen og gentageligheden af circRNA-lægemiddelproduktion.
Proces | Servicedetaljer | Leveringsperiode (Dag) | Leverancer |
circRNA-LNP Indpakning | Materiale- og væskeforebehandling | 2 | circRNA-LNP lægemiddelprodukt (DP) |
Microfluidic enhedsblanding | |||
Tangentiel strømfiltration | 1 | ||
Steriliséringsfiltrering | |||
circRNA-LNP kvalitetskontrol | Indkapslings-effektivitet | 1 | Prøvesedling |
Partikelstørrelse og Polydisperositetsindeks | |||
Zetapotential |
Hurtig syntese, høj effektivitet i forskning og udvikling og forudoptimerede løsninger;
Indkapslingsforholdet kan nå mere end 90%;
Størrelsen på fedtpartikler kan kontrolleres ved at ændre væskeinjsningshastigheden og forholdet;
circRNA-LNP produkter er valideret ved in vitro celleudtrykning og kan udtrykke det målprotein effektivt.
LNP-eGFP circRNA prøver forberedes, og de forskellige doser af dem (1ug, 2ug og 4ug) transfekteres direkte ind i 293T celler for at verificere, om de kan udtrykke det målprotein. Efter 48 timer med transfektering kan en tydelig fluorescerende signal observeres, og der er en dose-øget effekt på fluorescensintensiteten.
Lipo-circ_eGFP, bestående af liposom og ikke-kapsuleret eGFP circRNA, bruges som kontrol.