Wszystkie kategorie
Przygotowanie Białek Bez Tagów

Przygotowanie Białek Bez Tagów

Tagi białkowe, jako partnerzy fuzji stosowani w technologiach rekombinacji DNA, umożliwiają efektywną, jednokrokową czystkę afiniczną różnych białek/peptydów o różnych właściwościach. Mimo tego ważnego zalety, tagi jako zewnętrzne aminokwasydy mogą zmieniać strukturę białka i jego funkcje biologiczne. Dlatego białka lub peptydy bez tagów (tag-free) są preferowane, aby zapewnić bezpieczeństwo i skuteczność, zwłaszcza w obszarze biotechnologii farmaceutycznej. Rekombinantne białko z tagiem fuzji ma ograniczone możliwości uzyskania autoryzacji od agencji medycznych/regulacyjnych leków.

Na podstawie platformy R&D biologicznych mikrobowych Yaohai Bio-Pharma oferuje usługi personalizowanej przygotowywania białek bez etykietki (Tag-free), dedykowane spełnianiu unikalnych celów w zakresie badań, rozwoju i produkcji do zastosowań klinicznych.

Słowa kluczowe: produkcja białek bez etykiety, czysta separacja białek bez etykiety, przygotowanie białek na bazie wolnej od etykiety, wyrażanie i czyszczenie białek bez etykiety, wysokiej jakości białko docelowe bez etykiety

Zastosowanie: badania leków dla ludzi, rozwój leków weterynaryjnych, rozwój szczepionek rekombinacyjnych, produkcja dużych cząsteczek biologicznych rekombinacyjnych

Nasza Platforma Mikrobiologiczna R&D

Jesteśmy doświadczeni w inżynierii odmian mikrobowych, fermentacji oraz czyszczeniu produktów.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Drożdże: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

opcje dostosowane
Modalność Rekombinantne białko
Materiały początkowe Sekwencje genów, rekombinowany plazmid lub inżynierowane szczepy
Dostarczane materiały Czyszczenie: >80%, >85%, >90% Ilość: 0.2~10 g (do ustalenia w ramach projektu)
System wyrażenia i formacja

E. coli sekrecja periplazmatyczna, wyrażanie rozpuszczalne i w ciałach inkluzyjnych;

wyrażanie wewnątrzkomórkowe czy sekretoryczne drożdży

Metody Analizy Ultrafiolet (UV), test dwibenzynonowy (BCA), Bradford, lub Lowry do określania ilości
Elektroforeza w gelu poliacrylamidowym z dodatkiem sodowego dwunastuwanosnego siarczanu (SDS-PAGE) do testowania czystości
Opcjonalnie: western blot (WB), test immunoenzymatyczny (ELISA), chromatografia ciekła wysokiego ciśnienia (HPLC)
Residuałowe nieczystości Endotoksyny (opcjonalnie)
Szczegóły usług

Usługi

Szczegóły usług

Minimalny czas realizacji (dzień roboczy)

Synteza genu

Optymalizacja kodonów dla określonego gospodarza ekspresji

7 ~ 10 dni

Synteza genu

Konstrukcja plazmy/wektora

Klonowanie do plazmy/wektora

2 dni

Transformacja plazmy

Weryfikacja reakcją łańcuchową polimerazy (PCR), trawienie enzymami restrykcyjnymi, sekwencjonowanie genu

3 dni

Ekspresja białka w E. coli

Transformacja plazmidowa,

2 dni

Kultywacja w butelce do mieszania

3 dni

Fermentacja w skali 7L, optymalizacja

4 dni /partia

Czyszczenie białka bez tagu, optymalizacja

5~10 dni /partia

Testowanie elektroforezą w gelu poliakrylamidowym z dodatkiem sodowego dwunastekarbonylosulfianu (SDS-PAGE)

Ekspresja białka w drożdżach

Przygotowanie komórek rogielnych

4 dni

Linijność plazmidu i elektrotransformacja

Fermentacja w skali 7L, optymalizacja

5 dni

Czyszczenie białka bez tagu, optymalizacja

7 dni / partia

Czyszczenie białka bez tagu

5~10 dni /partia

Kontrola jakości przez SDS-PAGE

Dodatkowe Usługi (Opcjonalnie)
Uzyskaj bezpłatną wycenę

Get in touch