Plazmīdu DNS, kā in vitro transkripcijas (IVT) veidne ir svarīga izejviela mRNS ražošanai. Galvenais ir augsts plazmīdas DNS iznākums, augsta attīrīšanas pakāpe un augsta atgūšana mērķis plazmīdu procesa attīstības laikā.
Yaohai Bio-Pharma nodrošina vienas pieturas risinājumu plazmīdu izstrādei, tostarp augšpus (fermentācija), pakārtotā (attīrīšanas) procesa izstrādei un procesa raksturošanai un procesa apstiprināšanai. Mums ir liela pieredze plazmīdu iznākuma uzlabošanā un izolēšanā no sarežģītām matricām, attīstot un optimizējot fermentācijas, attīrīšanas un piemaisījumu noņemšanas procesus.
Plazmīdu ražošanas pamata bioprocess ietver: Escherichia coli (E. coli) fermentācija, šūnu ievākšana un sārmaina līze, dzidrināšana, koncentrēšana, trīspakāpju hromatogrāfijas process (sagūstīšana, starpproduktu attīrīšana un pulēšana) un koncentrēšana.
Informācija par pakalpojumu | Vienības darbība | parametri |
E. coli Fermentācija |
Kratīt Kolbu | Barotnes sastāvi, antibiotika, inokulāta tilpums, augšanas temperatūra utt. |
Fermentors (7 l) |
Antibiotika, inokulāta tilpums, augšanas temperatūra, pH, izšķīdušais skābeklis (DO), barošanas režīms (piemēram, padeves partija), barošanas vide, fermentācijas laiks utt. |
|
Šūnu novākšana | Mikrofiltrācija | Standarts E. coli ražas novākšanas process |
Šūnu līze | Šūnu resuspendēšana, sārmaina līze, neitralizācija | Sārmu attiecība, līzes laiks |
Noskaidrošana | Filtrācija | Neapstrādāta filtrēšana, 20 µm un 5 µm filtra vilciens (vēlams) |
Koncentrācija | Ultrafiltrācija, tangenciālās plūsmas filtrēšana | Poru izmērs (vai NMWC), transmembrānas spiediens (TMP), plūsma, filtrāta tilpuma attiecība pret membrānas laukumu |
Trīspakāpju hromatogrāfija | Izmēru izslēgšanas hromatogrāfija (SEC) vai gēla filtrēšanas hromatogrāfija (GFC) | Kolonnas garums un diametrs, bufera sastāvs, injekcijas tilpums, kustīgās fāzes sastāvs (adsorbcija un desorbcija), pH, plūsmas ātrums, līdzsvarošana, saistīšanās, mazgāšanas un eluēšanas apstākļi. |
Afinitātes hromatogrāfija (AF) | ||
Anjonu apmaiņas hromatogrāfija (AEX) | ||
Koncentrācija | Ultrafiltrācija, tangenciālās plūsmas filtrēšana | Poru izmērs (vai NMWC), transmembrānas spiediens (TMP), plūsma, filtrāta tilpuma attiecība pret membrānas laukumu |
Vairāk bioloģisko attīrīšanas procesu risinājumu |