N-glikozilācijas vietas analīze ir ļoti svarīga, lai izprastu glikānu funkcijas. Yaohai Bio-Pharma izmanto šķidruma hromatogrāfijas masas spektrometriju (LC-MS) pēc fermentatīvās šķelšanas N-glikozilācijas vietai.
Mēs esam bijuši iesaistīti dažādu lielu molekulu, tostarp rekombinanto apakšvienību vakcīnu, nanoķermeņu/VHH/ viena domēna antivielu (sdAb), antivielu fragmentu, hormonu/peptīdu, citokīnu, augšanas faktoru (GF), enzīmu, strukturālajā raksturojumā. utt.
Normatīvās prasības N-glikozilācijas vietai
Saskaņā ar ICH Q6B vadlīnijām “glikoproteīniem tiek noteikts ogļhidrātu saturs (neitrālie cukuri, aminocukuri un sialskābes). Turklāt, cik vien iespējams, tiek analizēta ogļhidrātu ķēžu struktūra, oligosaharīdu modelis (antenārais profils) un polipeptīdu ķēdes glikozilācijas vieta(-as).
Analītiskā metode
Analīze |
Metodes |
N-glikozilācijas vieta |
Šķidruma hromatogrāfijas masas spektrometrija (LC-MS) pēc fermentatīvās šķelšanas |
Procedūras
1. Olbaltumvielu šķelšana ar enzīmu, izmantojot tripsīnu vai citu proteāzi
2. Atsevišķa fragmenta glikopeptīdi
3. Apstipriniet N-glikozilācijas vietu ar LC-MS
4. Analizējiet datus