Augststrāmes procesa izstrādes nozīme
Augststrāves procesa (USP) fāze, kas pazīstama arī kā fermentācijas process, ir viena no sākotnējo bioprosesu fāzēm. Mikrobiālā fermentācija ir būtiska augstas blīvuma līdzekļu audzēšanai un ārējo gēnu izpausmei, kas tieši ietekmē biopreparātu ražojumu un izmaksas.
Biopreparātu izstrādes agrajos posmos (preciznes vai 1./2. fāze), galvenais uzmanības pievērsums ir veltīts izstrādei, kas var tikt mēroga palielināta, izmantojot zvēru produktu brīvus procesus, nodrošinot vidēju ražošanas efektivitāti un atbilstot visām produkta kvalitātes standartiem.
Kamēr pēdējās posmās (3. fāze vai komerciālais), mēs koncentrēsimies uz ražojuma apjomu, drošību, masveida pielietojamību un atkārtotību, izveidojot ekonomisku procesu. Aktivitātes, kas risina šos jautājumus, ir procesa raksturojums un procesa validācijas pētījumi. Tuvākajā laikā parasti tiek piemēroti kvalitāte no projektēšanas (QbD) un eksperimentu plānošanas (DoE) rīki.
Atslēgvārdi: procesa attīstība, optimizācija un validācija, fermentācijas process, mikrobioloģiskā šūnu fermentācija, baktēriju fermentācija, gļūdes fermentācija, augsta blīvuma fermentācija, inženieru šķirņu fermentācija
Pielietojums: bioparmaceitiķu nozare, cilvēku medicīna, dzīvnieku medicīna, vakcīnas, rekombinanti lieli molekulas bioloģiskie preparāti, rekombinanti bioloģiskie preparāti, bioloģiskie reagenti
Yaohai Bio-Pharma USP risinājumi
Gūstot labumu no vairāk nekā 10 gadu pieredzes mikrobioloģiskās fermentācijas jomā, Yaohai Bio-Pharma spēj palīdzēt atrisināt fermentācijas procesa izaicinājumus. Mēs varētu ātri izstrādāt augsta blīvuma fermentācijas stratēģijas Escherichia coli (E. coli) periplazmatiskās sekretēšanas, intracelulārās šķīstas vai inklūzijas ķermeni izpausmes, kā arī gēnu izpausme ārpus vai iekšpusē lieveņa.
Mūsu pieejamie vispārējie fermentācijas attīstības pakalpojumi ietver:
- Fermentācijas procesa dizains tiek veikts mazā 7L apjoma skalā, pievienojot barību masu
- Trīs partijas procesa validācija 7L fermentoros
- Vidēja procesa paplašinājums līdz 30L/70L
Mēs varētu elastīgi veikt dažādu parametru optimizāciju, lai sasniegtu vēlamo ražu vai proporciju, izmantojot vienu no faktoriem reizi (OTAF) vai eksperimentu plānošanu (DoE).
Galvenie fermentācijas parametri ir sekojoši:
Sastāvdaļas fermentācijai bez dzīvnieku avotiem
Bez antibiotiku vai ar antibiotikiem, inseminācijas tilpums
Augšanas temperatūra, pH, Izturīgais skābeklis (DO) līmenis
Barošanas režims (piem., fed-batch)
Inducera koncentrācija (piem., IPTG, metanol), Indukcijas punkts (līdzekļa siltuma/svars/OD600),
Indukcijas temperatūra, Indukcijas laiks
utt.
Pakalpojumu detaļas
| Pakalpojumi |
Processa plūvs |
| Kultivēšana šķēpietuvā (500 mL) |
Dabīgu sastāvdaļu brīva mediju pagatavošana → Mikroorganismu sēklu kultivēšana → Kultivēšana šķēpē → Indukcija → Ņemšana |
| Kultivēšana fermentorā (7 L) |
Dabīgu sastāvdaļu brīva mediju pagatavošana → Mikroorganismu sēklu kultivēšana → Augstas blīvuma šūnu fermentācija 7L bioreaktorā → Indukcija → Ņemšana |
| Proteīnu/peptīdu kvalitātes kontrole |
Pirmspelejas iekšējā risināmās izteiksmes: Mikrobioloģiskās šūnu saņemšana un atkāpšana → Ultrazvuku sadalīšana → Šūnu atlieku noņemšana → Nepārstrādātais izvilkums Inkluzeju ķermeni izteiksmes: Mikrobioloģiskās šūnu saņemšana un atkāpšana → Ultrazvuku sadalīšana → inkluzeju ķermenim gatavošana → Nepārstrādātais izvilkums Ārējā risināmās izteiksmes: Kultūras augstuma kolekcija → Koncentrācija un bufera maiņa → Nepārstrādātais izvilkums Kvalitātes analīze Nepārstrādātais izvilkums kā paraugs → Mērķa olbaltumvielu analīze ar SDS PAGE vai Ziemeļu bloti (WB) |
| Plazmidu kvalitātes kontrole |
Pirmspeleja un kvalitātes analīze Plazmidu izvilkums → DNA analīze, izmantojot agarose gelelektrofozę |
Studija par praksi
Mūsu klients mūs uzticējis palielināt mērķa polipeidhormonu ražojumu no 8 g/L līdz 10 g/L.
Balzoties uz Pilnu Faktoriālo Dizainu un Atbilžu Virsmas Dizainu rīku kopumā, mēs ātri atklājām un optimizējām galvenos fermentācijas parametrus. Optimizētajā augstas līdzekļu blīvuma fermentācijas procesā izpausmes līmenis pieauga līdz 10 g/L.
Mūsu pieredze
- Esam strādājuši ar dažādiem mikroorganismu dzimtiem, piemēram, E. Coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) un Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
- Mums ir pieredze ar E. coli periplazmas sekretēšanu, risināmajiem un inklūziju cietuma izpausmi, kā arī rauga intracelulāro vai ekstracelulāro izpausmi. Inklūziju cietuma ražošanas apjoms sasniedz līdz 10 g/L, savukārt risināmo olbaltumvielu apjoms mainās no 0,5 līdz 15 g/L.
- Mēs esam iesaistījušies dažādu lielo molekulu, tostarp rekombinantu subvakuču vakcinu, līdzīgu virusiem daļiņām (VLP), hormonu (insulīns, GLP-1, augšanas hormons), citokīnu (Interleukins-2/IL-2, IL-15, IL-21), augšanas faktoru (EGF, FGF, NGF), nanocieku/single-domain antigēnu (sdAbs), enzīmu, utt., izstrādē un ražošanā.
- Aprīkojums
7L*16 Fermentācijas sistēma
Cedex Bio analizators, Bioprosesu analizators
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
