Plazmid DNS, mint in vitro transzkripciós (IVT) templát, az mRNS-gyártás fontos nyersanyaga. A plazmid DNS nagy hozama, nagy tisztasága és nagy kinyerése a legfontosabb célkitűzés a plazmid folyamat fejlődése során.
A Yaohai Bio-Pharma egyablakos megoldást kínál a plazmidok fejlesztésére, beleértve az upstream (fermentáció), a downstream (tisztítás) folyamatfejlesztést és a folyamat jellemzését és a folyamat validálását. Nagy tapasztalattal rendelkezünk a plazmidhozam javításában és komplex mátrixokból történő izolálásában fermentációs, tisztítási és szennyeződés-eltávolítási folyamatok fejlesztésével és optimalizálásával.
A plazmidgyártás alapvető biofolyamata a következőket tartalmazza: Escherichia coli (E. coli) fermentáció, sejtgyűjtés és lúgos lízis, derítés, koncentrálás, háromlépéses kromatográfiás eljárás (befogás, közbenső tisztítás és polírozás) és koncentrálás.
Szolgáltatás részletei | Az egység műveletei | paraméterek |
E. coli erjesztés |
Rázza meg a lombikot | A táptalaj összetétele, az antibiotikum, az oltóanyag térfogata, a növekedési hőmérséklet stb. |
fermentor (7 liter) |
Antibiotikum, oltóanyag térfogata, növekedési hőmérséklet, pH, oldott oxigén (DO), etetési mód (pl. adagolás), tápközeg, fermentációs idő stb. |
|
Sejt betakarítás | mikroszűrés | Standard E. coli betakarítási folyamat |
Sejtlízis | Sejt reszuszpendálás, lúgos lízis, semlegesítés | Lúg arány, lízisidő |
Pontosítás | Szűrés | Nyers szűrés, 20 µm és egy 5 µm szűrősor (előnyös) |
Koncentráció | Ultraszűrés, tangenciális áramlási szűrés | Pórusméret (vagy NMWC), Transzmembrán nyomás (TMP), Fluxus, szűrlet térfogat/membrán terület aránya |
Háromlépéses kromatográfia | Méretkizárásos kromatográfia (SEC) vagy gélszűrős kromatográfia (GFC) | Oszlophossz és átmérő, puffer összetétel, injekció térfogata, mozgófázis összetétele (adszorpció és deszorpció), pH, áramlási sebesség, egyensúly, kötődés, mosás és elúció körülményei. |
Affinitáskromatográfia (AF) | ||
Anioncserélő kromatográfia (AEX) | ||
Koncentráció | Ultraszűrés, tangenciális áramlási szűrés | Pórusméret (vagy NMWC), Transzmembrán nyomás (TMP), Fluxus, szűrlet térfogat/membrán terület aránya |
További biológiai tisztítási eljárási megoldások |