Prema središnjoj dogmi, glasnička RNA (mRNA) je most za prijenos genetskog materijala od DNA do proteina.
mRNA ima biološku ulogu kodiranjem proteina in vivo, a zrela mRNA u eukariotskim organizmima sastoji se od pet komponenti: 5' Cap (struktura poklopca), 5' UTR (nekodirajuća regija), ORF (otvoreni okvir za čitanje), 3' UTR i 3' poliA rep (poliadenilatni rep).
Pojedinosti o uslugama
| Proces | Dodatna usluga | Pojedinosti usluge | Razdoblje isporuke (dan) |
| Dizajn i optimizacija sekvenci mRNA | Dizajn i optimizacija sekvenci kodiranja | CDS slijed poravnanja Optimizacija CDS kodona | 1 |
| Dizajn i optimizacija nekodirajućih sekvenci | Dizajn i optimizacija 5' UTR sekvence Dizajn i optimizacija 3' UTR sekvence poliA sekvencijski dizajn i optimizacija | 1-2 |
Opcije koje se mogu prilagoditi
| 5' UTR/3' UTR | - Priroda UTR sekvenca
- Mutant/projektovana UTR sekvenca
|
| 3' PoliA rep | - 100A ~120A rep (preporučeno)
- Segmentirani poliA rep
- Drugi prilagođeni rep
|
Uobičajene strategije za dizajn sekvenci mRNA
| Komponente mRNA | Biološke funkcije | Strategije optimizacije |
| 5' Cap | Zaštitite mRNA od razgradnje egzonukleazama i djelujte zajedno s poliA repom na 3' kraju, poliA veznim proteinom i proteinom faktora inicijacije translacije za iniciranje translacije proteina. | Prirodna struktura Cap1 izbjegava receptore za prepoznavanje uzoraka i tako smanjuje prirodni imunološki odgovor, što se može postići ko-transkripcijskim zatvaranjem u jednom koraku ili enzimskim ograničavanjem u dva koraka [pogledajte mRNA enzimatsko ograničavanje i kotranskripcijsko ograničavanje za detalje]. |
| 5' UTR | 5' UTR mogu prepoznati ribosomi, regulirati translaciju mRNA i utjecati na stabilnost mRNA. | Sadrže Kozakove sekvence bez vrlo stabilne sekundarne strukture. Prirodni UTR-ovi visoko izraženih gena poželjni su za in vitro transkripciju (IVT) mRNA kao što su α-globin i β-globin. |
| CDS | Regije koje kodiraju proteine i kodirajuće sekvence za antigene, antitijela ili druge funkcionalne proteine. | Optimizacija kodona povećava razinu translacije, uz napomenu da određeni neoptimalni kodoni mogu igrati ulogu u savijanju proteina. |
| 3' UTR | Regulirajte translaciju i stabilnost mRNA. | Prirodni UTR-ovi visoko izraženih gena poželjni su za IVT mRNA kao što su α-globin i β-globin. |
| 3' poliA rep | Regulirajte ekspresiju proteina i zaštitite strukturu poklopca od degradacije. | Potrebna je odgovarajuća duljina (100-150 bp); kodiranje polyA repa na transkripcijskom uzorku plazmida osigurava definiraniju duljinu poliA repa. |
Naše značajke
- Raznovrsni izbor UTR izvora
Višestruki izvori visoko izraženih prirodnih i modificiranih UTR biblioteka; zrela strategija modifikacije UTR-a;
- Vrhunski CDS tim za optimizaciju
Surađujte s profesionalnim timom za algoritme umjetne inteligencije kako biste dovršili optimizaciju kodona.
- Ravnomjerna distribucija poliA repa
Dodajte poliA sekvence prema DNK predlošcima kako biste preciznije kontrolirali duljinu mRNA.
- Raznovrsne kombinacije optimizacije
Postignite učinkovitu ekspresiju mRNA s niskom imunogenošću.
Case study
Dizajn sekvence dvostruke reporterske mRNA: mCherry-eGFP mRNA
Usluga mRNA tvrtke Yaohai Bio-Pharma nastavlja se nadograđivati dizajnom i optimizacijom tandemske sekvence dvostrukog reporterskog gena, čime se postiže koekspresija dualnih gena.
Upotrebom konvencionalnog transfekcijskog reagensa, dvostruka genska tandemska sekvenca mCherry-eGFP mRNA se transfektira u 293T stanice, a dva fluorescentna signala mCherry (crveni) i pojačanog zelenog fluorescentnog proteina (eGFP) otkrivaju se istovremenom ekspresijom nakon 48 sati, a naslagani grafikon je označen žutom bojom.
Ekspresija mCherry-eGFP mRNA u 293T stanici
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
