U kombinaciji s zahtjevima smjernica za analizu kvalitete mRNA, YAOHAI je razvio specifikacije za proizvode circRNA i može pružati usluge analize kvalitete za ciklične i linearizirane plazmidne šablon-e, tvari circRNA te gotov proizvod circRNA-LNP, a detalji usluga prikazani su u nastavku:
Proces | Opcionalna usluga | Detalji usluge | Rok Izrade (radni dan) |
Kontrola kvalitete plazmidnog DNA | Koncentracija/čistota | Ultravijoletna (UV) spektrofotometrija | 1-2 |
Plazmidna konformacija | Elektroforeza na agarosnom geлу (AGE) | ||
Kapilarna elektroforeza (CE) - opcionalno | |||
Identifikacija plazmida | Identifikacija restrikcijskog enzima/AGE | ||
Kontrola kvalitete circRNA | Koncentracija/čistota | Ultravijoletna (UV) spektrofotometrija | - |
Čistoća | Elektroforeza u gelu od agarosa (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC - opcionalno | 1 | ||
Učinkovitost inkapsulacije | RiboGreen metoda | 1 | |
Kontrola kvaliteta circRNA-LNP | Veličina čestica |
Dinamičko rasipanje svjetlosti (DLS) Dinamičko rasipanje svjetlosti (DLS) Dinamičko rasipanje svjetlosti (DLS) |
1 1 1 |
Indeks polidispersnosti | |||
Zeta potencijal | |||
Celanjski test jačine | Celanjska transfekcija | Postavljanje celija, celanska transfekcija | 4 |
Otkrivanje ciljne proteine | Fluorescentna promatranja, Western Blot/ELISA | 1-3 |
Yaohai Bio-Pharmahas izgradila zrelu platformu za sintezu, čišćenje, formuliranje, testiranje i transfekciju stanica za circRNA lijekovnu tvariću i gotov produkt circRNA-LNP.
Poslije transfekcije, odgovarajući fluorescentski signal i enzim-substratna reakcija, koji se smatraju specifičnim signalima ciljne proteine, mogu se otkriti.