U procesu pripreme in vitro transkripcije (IVT) mRNA, linearizirana plazmidna DNA je potrebna kao transkripcijski obrazac za IVT uz pomoć T7 RNA polimeraze. Plazmidna DNA visoke kvalitete ključna je za in vitro transkripciju.
Na temelju zrele platforme usluge pripreme plazmida, Yaohai Bio-Pharma može ponuditi uslugu pripreme linearizirane plazmidne DNK visoke čistoće i visokog standarda za postizanje učinkovite IVT transkripcije.
Pojedinosti o uslugama
| Proces |
Dodatna usluga |
Pojedinosti usluge |
Razdoblje isporuke (radni dan) |
| Priprema kružnog plazmida |
Sinteza gena |
Sinteza gena (treća strana) |
7-10 |
| Pojačanje plazmida |
Pojačanje plazmida |
2 |
| Ekstrakcija plazmida |
| Linearizirana priprema plazmida |
Linearizacija i pročišćavanje plazmida |
Linearizacija plazmida |
1 |
| Linearizacija pročišćavanja DNA |
| Kontrola kvalitete plazmidne DNA |
Čistoća koncentracije |
Ultraljubičasta (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Konformacija plazmida |
Elektroforeza u agaroznom gelu (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE)-po izboru |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija restrikcijskih enzima/ AGE |
Naše značajke
Fleksibilan odabir metoda linearizacije
Optimizacija ekstrakcije DNA i metoda pročišćavanja za postizanje visokih stopa oporavka.
- Stroga kontrola kvalitete
Strogi standardi kontrole procesa, sa stopom superhelikalne konformacije uzoraka plazmida za istraživanje od preko 80%.
Visoki standard i visoko učinkovite usluge pripreme plazmida i kontrole kvalitete za ispunjavanje eksperimentalnih potreba.
Case study
Uzimajući Yaohai Bio-Pharma kataloški proizvod mRNA_luciferaze kao primjer, uzorak plazmida predloška transkripcije (razina istraživanja) ima superhelikalni omjer veći od 90%, omjer linearizacije blizu 100%, i naknadni omjer transkripcije do 1:200 ( linearizirana plazmidna DNA:mRNA).
MRNA_luciferaza dobivena pripremom lineariziranog plazmida kao uzorka transfektira se u 293T stanice, a reakcijska aktivnost enzim-supstrat procjenjuje se 24 sata nakon transfekcije.
Može se detektirati očigledan snažan signal aktivnosti luciferaze, tj. protein luciferaze se učinkovito eksprimira, što sugerira da čistoća transkripcijskog uzorka može u potpunosti zadovoljiti zahtjev visokokvalitetne pripreme mRNA.
Test omjera supersmotanog plazmida
Validacija ekspresije mRNA luciferaze in vitro
HR
EN
AR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
