Priprema circRNA zahtjeva linearno RNA kao prethodni materijal (RNA prethodnik) za ciklizaciju, pri čemu se RNA prethodnik obično priprema koristeći linearizirani plazmidni DNA kao šablon za transkripciju i transkribira se in vitro s pomoću T7 RNA polimeraze.
Visokokvalitetni plazmidni DNA ključan je za transkripciju in vitro (IVT). Na temelju usavršenog servisa za pripremu plazmida, Yaohai Bio-Pharma može pružiti uslugu pripreme visoke čistoće i standardnog lineariziranog plazmidnog DNA (pDNA) kako bi se osigurala cjelovitost proizvoda IVT.
Detalji usluga
| Proces |
Opcionalna usluga |
Detalji usluge |
Rok Izrade (radni dan) |
| Priprema cirkularnog plazmida |
Sinteza gene |
Sinteza Geneova (Trece strane) |
7-10 |
| Uvećanje Plazmida |
Uvećanje Plazmida |
2 |
| Izlučivanje Plazmida |
| Priprema Linearnog Plazmida |
Linearizacija i očišćenje plazmida |
Linearnizacija plazmida |
1 |
| Ciscenje Linearnog DNA-a |
| Kontrola kvaliteta plazmidne DNK |
Koncentracija čistoće |
Ultravijoletna (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza na agarosnom geлу (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - opcionalno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija restrikcijskog enzima / AGE |
Naše značajke
G fleksibilan odabir metoda linearizacije
Optimizacija metoda izlučivanja i očišćavanja DNA kako bi se postigle visoke stope oporavka.
- Stroga kontrola kvalitete
Strogost standarda procesa kontrole, sa stopom superhelikalne konformacije uzorka plazmida za istraživanje preko 80%.
- Dovršeni platformski proces
Visoki standardi i visokaeefikasna usluga pripreme plazmida i kontroliranja kvaliteta kako bi se ispunile eksperimentalne potrebe.
Studija slučaja
Uzevći kao primjer proizvod Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA, omjer superplatiođenih uzoraka šablonskih plazmida (istraživačke klase) je veći od 70%, s linearizacijskom stopom blizu 100%.
mCherry circRNA se priprema s linearnim plazmidom kao šablonom i transficira u 293T stanice. Visoki nivo izražavanja fluorescencije (crvena fluorescencija) otkriven je nakon 24 sata transfekcije, što će se pojačati nakon 48 sati, a još uvijek može biti otkriven na 7. dan i 14. dan nakon transfekcije.
mCherry proteini su stabilno i učinkovito izražavani, a čistoća transkripcijskog šablona može ispunjiti zahtjeve cirkularnog RNA lijeka (DP) visoke kvalitete.
Validacija in vitro izražavanja mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
