Osnova inkapsulacije je dizajn i razvoj sustava za dostavu. Dobro dizajnirani sustav za dostavu omogućuje da se molekule circRNA unesu u tijelo bez da se degradišu RNK enzimi, a zatim se učinkovito dostave na ciljani lokaciju, preskoče membraanu stanice i oslobode se unutar stanice.
Lipidne nanocjesticice (LNP) su najbolji dostupni sustav za dostavu, s prednostima u inkapsulaciji, izražavanju u živome tijelu i sigurnosti u živome tijelu u usporedbi s drugim sustavima za dostavu. LNP s fragmentima nukleinske kiseline lako se šutaju u stanice i formiraju intrastanicijska tela. Nakon što ulaze u stanicu, kiselina intrastanicijskoga tijela protonira i pozitivno nabija glavu jonizirane lipide, čime se spaja s unutrašnjom membranom intrastanicijskoga tijela i oslobađa ciljana nukleinska kiselina u stanicu za djelovanje.
Yaohai Bio-Pharma usluga circRNA nastavlja se poboljšavati i može pružiti uslugu obaljivanja circRNA-LNP kako bi se optimirali odgovarajući ključni parametri procesa i poboljšala konzistentnost i reprodukcibilnost proizvodnje lijekova circRNA.
Proces | Detalji usluge | Rok isporuke (Dan) | Isporučivi |
circRNA-LNP Encapsulation | Obrada materijala i tečnosti | 2 | circRNA-LNP farmaceutska smjesa (DP) |
Mikrofluidna uređaja mešanja | |||
Tangencijalna toka filtracije | 1 | ||
Sterilizacijska filtracija | |||
kvalitativni kontrola circRNA-LNP | Učinkovitost inkapsulacije | 1 | Izvješće o ispitivanju |
Veličina čestica i indeks polidispersnosti | |||
Zeta potencijal |
Brza sinteza, visoka učinkovitost R&D i pre-optimizirana rješenja;
Omjer inkapsulacije može biti veći od 90%;
Veličina lipidnih nanocestic se može kontrolirati mijenjanjem brzine i omjera uljevanja fluida;
circRNA-LNP proizvodi su potvrđeni in vitro ćelijskim izražavanjem i mogu učinkovito izražavati ciljani protein.
Pripremljeni su uzorci LNP-eGFP circRNA, a različite doze njih (1ug, 2ug i 4ug) direktno se transfiraju u 293T ćelije kako bi se provjerilo mogu li izraziti ciljani protein. Nakon 48 sati transfekcije, može se promatrati jasan fluoresecentski signal, a postoji efekat povećanja doze intenziteta fluorescencije.
Lipo-circ_eGFP, sastavljen od liposoma i neenkap슐suliranog eGFP circRNA koristi se kao kontrola.