Potencijalni asaji temeljeni na stanici
Značaj asaja potencije mRNA
S brzim razvojem mRNA cjepiva i lijekova, potrebna su specifična analitička sredstva za testiranje potencije (definiranja njihove biološke aktivnosti), uključujući prijevodnu učinkovitost mRNA. Ti metodi su tipično temeljeni na transfekciji stanica i funkcionalnim asajima ciljne proteine.
Yaohai Bio-Pharma pruža celijarne asaje potencije za mRNA lijekove ili proizvode LNP, uključujući transfekciju stanica (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 stanice itd.) i ELISA ili Western Blotting (WB) asaje.
Uredbeni zahtjevi za asajima potencije
Prema promatranjima WHO o regulaciji, „Potencija svakog serije konačne cjepiva treba biti određena pomoću odgovarajuće kvantitativne i validirane funkcionalne metode. Mogući in vitro testovi potencije mogu uključivati transfekcijske sustave temeljene na stanici ili bezstanične asanje.” USP je preporučio „transfekcijski sustav temeljen na stanici” za testiranje potencije mRNA, tj. izražavanje ciljnog proteina.
Analitička metoda
|
Analiza
|
Metode
|
|
Testovi potencije
|
Transfekcija temeljena na stanici i identifikacija ciljnog proteina:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 stanice, itd.
|
Postupak
Korak 1. Transfekcija temeljena na stanici s mRNA ili mRNA-LNP
Stanice se uzgoje i transficiraju s mRNA ili mRNA-LNP. detaljnije, mRNA se transficira nakon što se smiješa s transfekcijskim reagensom, dok se mRNA-LNP direktno transficira u stanice. Nakon 24-48 sati, očistite nadmorsku tvari koja sadrži izražani protein centrifugiranjem.
Korak 2. Funkcionalni testovi ciljnog proteina
Izvršite ELISA ili WB asanje za procjenu funkcionalnog vezivanja ciljnih proteina.
Studija slučaja
Celanobazirani potencijalni testovi uzoraka mRNA
Yaohai-BioPharma je razvila metodu celanobaziranog potencijalnog testiranja za mRNA, koja uključuje kultiviranje stanica, transfekciju stanica i proteinska funkcionalna asanja. Transfekcirali smo eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferaza mRNA, mRNA špicastog proteina u 293T stanice i otkrili ciljni protein putem fluorescencije, luminescencije ili bojne oznake, WB, ELISA.
Celanobazirana potencijalna asanja proizvoda mRNA od strane Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
