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mRNA-Sequenzdesign

mRNA-Sequenzdesign

Gemäß dem zentralen Dogma ist die Messenger-RNA (mRNA) die Brücke für die Übertragung des genetischen Materials von der DNA auf die Proteine.

mRNA spielt eine biologische Rolle, indem sie Proteine ​​in vivo kodiert, und reife mRNA in eukaryotischen Organismen besteht aus fünf Komponenten: 5'-Cap (Cap-Struktur), 5'-UTR (nicht-kodierende Region), ORF (offener Leserahmen), 3'-UTR und 3'-PolyA-Schwanz (Polyadenylatschwanz).

undefiniert

Details zu den Dienstleistungen
ProzessOptionaler ServiceService DetailsLieferzeitraum (Tag)
mRNA-Sequenzdesign und -optimierungDesign und Optimierung von Codierungssequenzen

CDS-Sequenzausrichtung

CDS-Codon-Optimierung

1
Design und Optimierung nichtkodierender Sequenzen

5'-UTR-Sequenzdesign und -optimierung

3'-UTR-Sequenzdesign und -optimierung

Design und Optimierung von PolyA-Sequenzen

1-2
Anpassbare Optionen
5' UTR/3' UTR
  • Nature UTR-Sequenz
  • Mutierte/konstruierte UTR-Sequenz
3' PolyA-Schwanz
  • 100 A ~ 120 A Endstück (empfohlen)
  • Segmentierter PolyA-Schwanz
  • Anderes Custom-Heck
Gängige Strategien für das mRNA-Sequenzdesign
mRNA-KomponentenBiologische FunktionenOptimierungsstrategien
5' KappeSchützt mRNA vor dem Abbau durch Exonukleasen und wirkt zusammen mit dem PolyA-Schwanz am 3'-Ende, dem PolyA-Bindungsprotein und dem Translationsinitiationsfaktor-Protein, um die Proteintranslation zu initiieren.Die natürliche Cap1-Struktur vermeidet Mustererkennungsrezeptoren und reduziert somit die natürliche Immunantwort, was durch eine einstufige co-transkriptionelle Kappe oder eine zweistufige enzymatische Kappe erreicht werden kann (Einzelheiten finden Sie unter mRNA-enzymatische Kappe und co-transkriptionelle Kappe).
5' UTRDie 5'-UTR kann von Ribosomen erkannt werden, reguliert die Translation von mRNA und beeinflusst die Stabilität von mRNA.Enthalten Kozak-Sequenzen ohne sehr stabile Sekundärstruktur. Natürliche UTRs hochexprimierter Gene werden für In-vitro-Transkription (IVT)-mRNAs wie α-Globin und β-Globin bevorzugt.
CDSProteinkodierende Regionen und kodierende Sequenzen für Antigene, Antikörper oder andere funktionelle Proteine.Durch die Codon-Optimierung wird der Translationsgrad erhöht, wobei zu beachten ist, dass bestimmte nicht optimale Codons bei der Proteinfaltung eine Rolle spielen können.
3' UTRReguliert die mRNA-Translation und -Stabilität.Natürliche UTRs von hochexprimierten Genen wie α-Globin und β-Globin werden für IVT-mRNAs bevorzugt.
3' PolyA-SchwanzRegulieren Sie die Proteinexpression und schützen Sie die Kappenstruktur vor Abbau.Eine angemessene Länge (100–150 bp) ist erforderlich. Durch die Kodierung des PolyA-Schwanzes auf dem Transkriptions-Vorlagenplasmid wird eine besser definierte Länge des PolyA-Schwanzes gewährleistet.
Unsere Eigenschaften
  • Diversifizierte UTR-Quellenauswahl

Mehrere Quellen hochexprimierter natürlicher und modifizierter UTR-Bibliotheken; ausgereifte UTR-Modifizierungsstrategie;

  • Hochmodernes CDS-Optimierungsteam

Arbeiten Sie mit einem professionellen KI-Algorithmenteam zusammen, um die Optimierung der Codons abzuschließen.

  • Gleichmäßige PolyA-Schwanzverteilung

Fügen Sie PolyA-Sequenzen gemäß DNA-Vorlagen hinzu, um die mRNA-Länge präziser zu steuern.

  • Diversifizierte Optimierungskombinationen

Erreichen Sie eine effiziente Expression von mRNA mit geringer Immunogenität.

Fallstudie

Sequenzdesign einer Dual-Reporter-mRNA: mCherry-eGFP-mRNA

Der mRNA-Service von Yaohai Bio-Pharma wird durch die Entwicklung und Optimierung einer Doppelreportergen-Tandemsequenz, die eine Koexpression dualer Gene ermöglicht, kontinuierlich verbessert.

Mithilfe eines herkömmlichen Transfektionsreagenz wird die Doppelgen-Tandemsequenz mCherry-eGFP-mRNA in 293T-Zellen transfiziert und nach 48 Stunden werden zwei Fluoreszenzsignale von mCherry (rot) und verstärktem grün fluoreszierendem Protein (eGFP) mit gleichzeitiger Expression erkannt, und das gestapelte Diagramm ist gelb hervorgehoben.

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Expression von mCherry-eGFP-mRNA in 293T-Zellen

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