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Kundenspezifische circRNA-Synthese

Kundenspezifische circRNA-Synthese

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IVT-RNA

Kundenspezifische circRNA-Synthese

Zirkuläre mRNA (circRNA) wird häufig bei der Untersuchung von Gen- oder Proteinfunktionen verwendet. Mittlerweile erfreut es sich ähnlich wie mRNA großer Beliebtheit bei der Entwicklung prophylaktischer und therapeutischer Biologika.

Yaohai Bio-Pharma hat eine Reihe von circRNA-Synthesetechnologien etabliert, um qualitativ hochwertige RNA bereitzustellen, wie z. B. Sequenzdesign und -optimierung, In-vitro-Transkription (IVT), Zirkularisierung/Zyklisierung, Reinigung und Einkapselung von Lipid-Nanopartikeln (LNP). Alle Produkte werden unter strengen Qualitätskontrollstandards (QC) freigegeben.

CircRNA-Anwendungen

Im Vergleich zu linearer mRNA weist zirkuläre RNA (circRNA) eine stabilere Struktur auf und ist ein wichtiger Brennpunkt in der aktuellen Nukleinsäure-Arzneimittelforschung. Es verfügt über ein breites Anwendungsspektrum in verschiedenen Bereichen, sei es als kodierende circRNA oder nicht-kodierende circRNA, einschließlich prophylaktischer Impfstoffe gegen Infektionskrankheiten, therapeutischer Onkologie-Impfstoffe, therapeutischer Onkologie-Medikamente, Proteinersatztherapie, regenerative Medizin, Zell- und Gentherapie (CGT). , molekulare Schwammrolle und RNA-Aptamer.

Service Details
Prozess Optionaler Service Service Details Lieferzeitraum (Tag)
circRNA-Sequenzdesign und -optimierung Design und Optimierung von Codierungssequenzen CDS-Codon-Optimierung 1
Design und Optimierung nichtkodierender Sequenzen Intron- und Exon-Sequenz, Design und Optimierung homologer Arme und Spacer 1-2
Zirkuläre Plasmidvorbereitung Gensynthese Gensynthese (Drittanbieter) 7-10
Plasmidamplifikation Plasmidamplifikation 2
Plasmidextraktion
Vorbereitung linearisierter Plasmide Plasmidlinearisierung und -reinigung Plasmidlinearisierung 1
Linearisierung der DNA-Reinigung
In-vitro-Transkription und Cyclisierung In-vitro-Transkription und Cyclisierung In-vitro-Transkriptions- und Cyclisierungsreaktionen 1-2
RNase R-Verdauung
Optimierung – optional Reaktionszusammensetzung, Zeitoptimierung 2-5
circRNA-Reinigung Konventionelle Reinigungsmethode Lithiumchlorid-Ausfällung 1
Magnetische Perlenreinigung 1
Hochreine circRNA-Reinigung Präparative Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) 1-2
Pufferaustausch Ultrafiltration 1
circRNA Lyophilisierung Probenabfüllung Füllung 2-3
Gefriertrocknung Vorgefrieren
Primärtrocknung (Sublimation)
Sekundärtrocknung (Desorption)
circRNA-LNP-Einkapselung LNP-Kapselung Material- und Flüssigkeitsvorbehandlung 2
Mischen mikrofluidischer Geräte
Pufferaustausch Tangentialflussfiltration 1
Sterilisieren Filtration
Qualitätskontrolle von Plasmid-DNA Konzentration/Reinheit Ultraviolett (UV)-Spektrophotometrie 1-2
Plasmidkonformation Agarosegelelektrophorese (AGE)
Kapillarelektrophorese (CE) – optional
Plasmid identifizieren Identifizierung von Restriktionsenzymen/AGE
Qualitätskontrolle von circRNA Konzentration/Reinheit Ultraviolett (UV)-Spektrophotometrie -
Purity Agarosegelelektrophorese (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC-optional 1
Qualitätskontrolle von circRNA-LNP Kapselungseffizienz RiboGreen-Methode 1
Partikelgröße Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Polydispersitätsindex Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Zetapotential Dynamische Lichtstreuung (DLS) 1
Zellbasierter Potenztest Zelltransfektion Zellplattierung, Zelltransfektion 4
Erkennung von Zielproteinen Fluoreszenzbeobachtung, Western Blot/ELISA 1-3
Case Study

Wir haben verstärkte grün fluoreszierende Protein-CircRNA (eGFP-CircRNA), mCherry-CircRNA und Luciferase-CircRNA in 293T-Zellen transfiziert und das Zielprotein durch Fluoreszenz, Lumineszenz- oder Farbsignal, Western Blot (WB) und Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) nachgewiesen.

Zellbasierte Wirksamkeitstests von circRNA-Proben von Yaohai Bio-Pharma

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