Im Vorbereitungsprozess der in vitro Transkription (IVT) mRNA wird linearisiertes Plasmid-DNA als Transkriptionsvorlage für die IVT mit Hilfe von T7 RNA-Polymerase benötigt. Hochwertiges Plasmid-DNA ist entscheidend für die in vitro Transkription.
Basierend auf der reifen Plasmid-Vorbereitungsdienstleistungsplattform kann Yaohai Bio-Pharma einen Dienst zur Vorbereitung von linearisiertem Plasmid-DNA hoher Reinheit und hoher Standards anbieten, um eine effiziente IVT-Transkription zu erreichen.
Dienstleistungen Details
| Prozess |
Optionale Dienstleistungen |
Service Details |
Lieferzeit (Arbeitstag) |
| Vorbereitung zirkulärer Plasmide |
Gen-Synthese |
Gensch Synthese (Drittanbieter) |
7 bis 10 |
| Plasmidvermehrung |
Plasmidvermehrung |
2 |
| Plasmidextraktion |
| Präparation von linearisierten Plasmiden |
Linearisierung und Reinigung von Plasmiden |
Plasmidlinearisierung |
1 |
| Reinigung von linearisiertem DNA |
| Qualitätskontrolle von Plasmid-DNA |
Konzentration Reinheit |
Ultraviolett (UV) Spektrophotometrie |
1-2 |
| Plasmidkonformation |
Agarose-Gel-Elektrophorese (AGE) |
| Kapillarelektrophorese (CE) - Optional |
| Plasmid identifizieren |
Restriktionsenzym-Identifikation / AGE |
Unsere Funktionen
Flexible Auswahl von Linearisierungsmethoden
Optimierung der DNA-Extraktions- und -reinigungsverfahren, um hohe Rückgewinnungsquoten zu erreichen.
- Strenge Qualitätskontrolle
Strenge Prozesskontrollstandards, mit einer Überlagerungsrate von Plasmidproben für Forschung von über 80 %.
- Reifes Plattformverfahren
Dienstleistungen zur hochwertigen und effizienten Plasmidvorbereitung und Qualitätssicherung, um experimentelle Anforderungen zu erfüllen.
Fallstudie
Am Beispiel des Produkts mRNA_luciferase aus dem Katalog von Yaohai Bio-Pharma: Das Transkriptionstemplate-Plasmid (Forschungsqualität) hat einen Überwindungsgehalt von über 90 %, einen Linearisierungsgrad nahe bei 100 % und einen nachfolgenden Transkriptionsgrad von bis zu 1:200 (linearisiertes Plasmid-DNA:mRNA).
Das mRNA_luciferase, das durch die Vorbereitung eines linearisierten Plasmids als Template erhalten wurde, wird in 293T-Zellen transfiziert, und die Enzym-Substrat-Reaktionsaktivität wird 24 Stunden nach der Transfektion bewertet.
Ein deutliches starkes Luciferase-Aktivitätssignal kann detektiert werden, d.h. das Luciferase-Protein wird effizient exprimiert, was darauf hinweist, dass die Reinheit des Transkriptionstemplates vollständig den Anforderungen an die Herstellung hochwertiger mRNA entspricht.
Analyse des Überwindedungsgrades von Plasmiden
Validierung der luciferase-mRNA-Expression in vitro
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