Die Grundlage der Kapselung ist das Design und die Entwicklung des Delivery-Systems. Ein gut entwickeltes Delivery-System ermöglicht es circRNA-Molekülen, den Körper zu betreten, ohne von RNA-Enzymen abgebaut zu werden, und anschließend effektiv zum Zielort geliefert, durch die Zellmembran transportiert und intrazellulär freigesetzt zu werden.
Lipidnanopartikel (LNPs) sind das beste verfügbare Delivery-System, mit Vorteilen bei der Kapselung, der in-vivo-Expression und der in-vivo-Sicherheit im Vergleich zu anderen Delivery-Systemen. LNPs mit Nukleinsäurefragmenten werden leicht von Zellen aufgenommen und bilden intrazelluläre Strukturen. Sobald sie die Zelle betreten, protonieren sich die ionisierten Lipide in der sauren Umgebung der intrazellulären Struktur und laden positiv, wodurch sie sich mit der Inneren Membran der intrazellulären Struktur verschmelzen und die Ziel-Nukleinsäure in die Zelle freisetzen, um dort zu wirken.
Yaohai Bio-Pharma circRNA Service verbessert sich weiter und kann den circRNA-LNP-Encapsulation-Service anbieten, um relevante kritische Prozessparameter zu optimieren und die Konsistenz und Wiederholbarkeit der circRNA-Medikamentenherstellung zu verbessern.
Prozess | Service Details | Lieferzeit (Tag) | Liefergegenstände |
circRNA-LNP Encapsulation | Material- und Flüssigkeitsvorbehandlung | 2 | circRNA-LNP-Arzneimittelprodukt (DP) |
Mikrofluidikmischung | |||
Tangentialflussfiltration | 1 | ||
Sterilisierende Filtration | |||
circRNA-LNP-Qualitätskontrolle | Einkapselungseffizienz | 1 | Testbericht |
Partikelgröße und Dispersitätsindex | |||
Zetapotential |
Schnelle Synthese, hohe Forschungs- und Entwicklungs-effizienz sowie voroptimierte Lösungen;
Das Einkapselungsverhältnis kann mehr als 90 % erreichen;
Die Größe der Lipidnanopartikel kann durch Ändern der Flüssigkeitsinjektionsrate und -verhältnisse gesteuert werden;
circRNA-LNP Produkte werden durch in vitro Zellenexpression validiert und können das Zielprotein effizient ausdrücken.
LNP-eGFP circRNA Proben werden zubereitet und verschiedene Dosen davon (1ug, 2ug und 4ug) werden direkt in 293T Zellen transfektiert, um zu überprüfen, ob sie das Zielprotein exprimieren können. Nach 48 Stunden der Transfektion kann ein klares fluoreszierendes Signal beobachtet werden, und es gibt einen dosis-abhängigen Effekt der Fluoreszenzintensität.
Lipo-circ_eGFP, bestehend aus Liposomen und nicht kapseltem eGFP circRNA, wird als Kontrolle verwendet.