Всі Категорії
Підготовка білок без тегів

Мікробіальний CDMO

Підготовка білок без тегів

Теги більшових протеїнів, які використовуються як партнери фузії в рекомбінантних ДНК-технологіях, дозволяють ефективну однокрокову афінітну чистку різноманітних більшових/пептидних молекул з різними характеристиками. Незважаючи на цей важливий перевагу, теги як зовнішні амінокислоти можуть змінювати структуру протеїну та його біологічні функції. Тому непозначенні (без тегів) протеїни або пептиди є більш відповідними для забезпечення безпеки та ефективності, особливо в біофармацевтичній галузі. Рекомбінантному протеїну з фузійним тегом є обмежені можливості отримання ліцензії від медичних/фармацевтичних організацій.

На базі платформи мікробіальної біотехнологічної дослідницько-розробничої діяльності Yaohai Bio-Pharma пропонує послуги з підготовки протеїнів без тегів (Tag-free), спрямовані на виконання унікальних завдань для наукових досліджень, розробок та виробництва для клінічного використання.

Ключові слова: виробництво протеїнів без тегів, очищення непоміченого протеїну, підготовка протеїнів без тегів, вираз і очищення протеїнів без тегів, цільовий протеїн без тегів

Застосування: дослідження людської медицини, розробка ветеринарної медицини, розробка рекомбінаційних вакцин, виробництво рекомбінаційних великочастинкових біологічних препаратів

Наша мікробіальна платформа R&D

Ми маємо досвід у мікробіальному інженерінгу штамів, ферментації та очищенні продукту.

Бактерії: Escherichia coli (E. coli)

Дріжджі: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Індивідуальні варіанти
Модальность Рекомбінаційний білок
Початкові матеріали Генетичні секвенції, рекомбінантний плазмід або інженеровані штамни
Результати виконання Очищення: >80%, >85%, >90% Кількість: 0.2~10 г (буде визначено проектом)
Система експресії та формування

E. coli експресія у періплазматичному просторі, розчинна та експресія у inclusion body;

Експресія у дріжджових клітинах або секреторна експресія

Методи аналізу Ультрафіолетовий (UV), асай бічінонієвої кислоти (BCA), Bradford або Lowry для визначення кількості
Електрофорез у поліакріламідовому гелі з содієм додекилсулфату (SDS-PAGE) для очищення та тестування
Опціонально: западний блот (WB), ензим-зв'язаний імунно- sorбентний аналіз (ELISA), високопродуктивна розчинна хроматографія (HPLC)
Залишкові нез纯стоти Ендотоксин (опціонально)
Деталі послуги

Послуги

Деталі послуги

Мінімальний термін (робочий день)

Синтез генів

Оптимізація кодонів для специфічного виразного господаря

7~10 днів

Синтез генів

Конструювання плазміди/вектора

Клонування до плазміди/вектора

2 дні

Трансформація плазмиди

Верифікація полімеразною ланцюговою реакцією (PCR), ділення роботою обмежувальних ензимів, секвенування гену

3 дні

Експресія білка в E. coli

Трансформація плазмиди,

2 дні

Вирощування у колбах з миттєвою мішанкою

3 дні

ферментація масштабом 7Л, оптимізація

4 дні / партія

Очищення білка без тегу, оптимізація

5~10 днів / партія

Перевірка за допомогою електрофорезу у полиакриламідному гелі з содієвим дodeцил-сульфатом (SDS-PAGE)

Вираз протеїнів у дріжджах

Підготовка компетентних клітин дріжджів

4 дні

Лінеаризація плазміди та електротрансформація

ферментація масштабом 7Л, оптимізація

5 днів

Очищення білка без тегу, оптимізація

7 днів/ партія

Очищення протеїнів без тегу

5~10 днів / партія

Контроль якості за допомогою SDS-PAGE

Додаткові послуги (опціонально)
Отримайте безкоштовну пропозицію

Get in touch