Визначення молекулярної маси методом РХ-МС
Інтактна молекулярна маса завжди вважалася важливою характеристикою біопрепаратів. Аналіз непошкодженої молекулярної маси використовується для демонстрації білкових/пептидних продуктів і перевірки біопрепаратів. Вимірювання молекулярної маси є вимогою нормативних вказівок.
Yaohai Bio-Pharma пропонує аналіз інтактної молекулярної маси в нативних, відновлених, N-деглікозильованих умовах. Ми використовуємо рідинну хроматографію-мас-спектрометрію (РХ-МС) для визначення молекулярної маси непошкодженої речовини.
Нормативні вимоги до молекулярної маси
У ICH Q6 рекомендовано, що «молекулярну масу (або розмір) визначають за допомогою ексклюзійної хроматографії, електрофорезу в SDS-поліакриламідному гелі (у відновних і невідновних умовах), мас-спектрометрії (MS) та інших відповідних методів».
Аналітичні методи
| Аналіз |
Методи |
| Молекулярна вага |
LC-MS / Рідинна хроматографія/Електророзпилювальна мас-спектрометрія (LC/ES-MS) нативних, відновлених, N-деглікозильованих білків або субодиниць |
Аналітичні процедури
Інтактна молекулярна маса:
- Виконання РХ-МС на нативному зразку в отриманому вигляді.
- LC-MS аналіз даних.
Знижена молекулярна маса:
- Обробка зразка білка відповідним відновником;
- Виконання РХ-МС на відновленому білку;
- LC-MS аналіз даних.
N-деглікозильована молекулярна маса:
- Видалення N-гліканів відповідним ферментом;
- Виконання РХ-МС на N-деглікозильованому білку;
- LC-MS аналіз даних.
Знижена та N-деглікозильована молекулярна маса:
- Обробка зразка білка відповідним відновником;
- Видалення N-гліканів відповідним ферментом;
- Виконання РХ-МС на відновленому та N-деглікозильованому білку;
- LC-MS аналіз даних.
Молекулярна маса субодиниці білка:
- Розщеплення субодиниці
- Виконання РХ-МС на білковій субодиниці
- РХ-МС аналіз даних
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
