Визначення молекулярної маси за допомогою LC-MS
Цілкова молекулярна маса завжди вважалася важливою характеристикою біопродуктів. Аналіз цілкової молекулярної маси використовується для демонстрації продуктів белків/пептидів та перевірки біопродуктів. Вимірювання молекулярної маси є вимогою регуляторних норм.
Yaohai Bio-Pharma пропонує аналіз цілкової молекулярної маси у природних, редуктованих та N-деґликозованих умовах. Ми використовуємо Жидні Хроматографію-Мас Спектрометрію (LC-MS) для визначення цілкової молекулярної маси.
Регуляторні вимоги до молекулярної маси
У ICH Q6 рекомендується: "молекулярна маса (або розмір) визначається за допомогою хроматографії на гелі, електрофорезу у поліакріламідовому желе з додаванням SDS (у редуктованих і нередуктованих умовах), мас-спектрометрії (MS) та інших відповідних методів".
Аналітичні методи
| Аналіз |
Методи |
| Молекулярна вага |
LC-MS / Жидкостна хроматографія/Електроспрейна мас-спектрометрія (LC/ES-MS) нативних, редукованих, N-деглікозилованих білків або підодиниць |
Аналітичні процедури
Цілковита молекулярна маса:
- Проведення LC-MS на нативному вибірці у прийманому вигляді.
- Аналіз даних LC-MS.
Редукована молекулярна маса:
- Обробка білкового вибірця відповідним редукуючим агентом;
- Проведення LC-MS на редукованому білку;
- Аналіз даних LC-MS.
N-деглікозилована молекулярна маса:
- Видалення N-гліканів за допомогою відповідного ензиму;
- Виконання LC-MS на N-деглікозилованому белку;
- Аналіз даних LC-MS.
Зменшений та N-деглікозилований молекулярний ваг:
- Обробка білкового вибірця відповідним редукуючим агентом;
- Видалення N-гліканів за допомогою відповідного ензиму;
- Виконання LC-MS на зменшенному та N-деглікозилованому белку;
- Аналіз даних LC-MS.
Молекулярний ваг підоблікової одиниці белка:
- Розщеплення підобліку
- Виконання LC-MS на підобліковій одиниці белка
- Аналіз даних LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
