Дисульфідні зв'язки іноді називають S-S зв'язками або дисульфідними мостами. Дисульфідні мостики впливають на біоактивність біологічних препаратів, таких як пептиди, протеїни та антитіла.
Yaohai Bio-Pharma пропонує послуги аналізу дисульфідних зв'язків, головним чином на основі Жидкопhaсової Хроматографії - Мас-Сpectрометрії (LC-MS).
Ми брали участь у характеристиці структури протеїнів різних великочастинкових молекул, включаючи Рекомбінаційні Підодинкові Вакцини, Нанотіла/ВНН/Однодоменні Антитіла (sdAbs), Фрагменти Антитіл, Гормони/Пептиди, Цитокіни, Фактори Зростання (GF), Ензими, Колагени тощо.
Регуляторні вимоги для дисульфідних зв'язків
У різних біологічних препаратах є різні кількості та формування дисульфідних мостиків, які повинні бути повністю оцінені під час досліджень характеристик протеїнів, якщо очікувана первинна амінокислотна послідовність продукту містить амінокислоту цистейн. Це також вимагається з регуляторного документа ICH Topic Q6B.
Аналітичні методи
Аналіз |
Методи |
Дисульфідні зв'язки |
Жидкостна хроматографія-мас-спектрометрія (LC-MS) після діgestії |
Для необхідних даних повної оцінки мостики дисульфіду та вільних тіолів, науковці з Yaohai Bio-pharma проводять картографування пептидів після діgestії за допомогою спеціального протеазу. Потім аналізують за допомогою онлайн LC/ Електроспрей Іонізаційної Мас-Сpectрометрії (ES-MS) і/або LC/ES-MS/MS до та після редукції.
Yaohai Bio-pharma також може провести тест Елмана, який є важливою частиною будь-якої повної оцінки продукту, що містить цистейн. У тесті Елмана ми дериватизуємо сульфгідрогрупи за допомогою (5,5’-дитио-біс-[2-нітро-bенzoєва кислота]). Для визначення рівнів вільних тіолів отриманий продукт аналізується методом УФ-спектрофотометрії на довжині хвилі 412 нм.