Yaohai Bio-Pharma пропонує тестування N-кінцевої послідовності та послуги з аналізу даних на основі рідинної хроматографії-мас-спектрометрії (LC-MS) або методу деградації Едмана, який дозволяє визначати амінокислоти на відповідних кінцях цікавого білка. N-кінцева модифікація також може бути проаналізована за допомогою РХ-МС.
Ми брали участь у структурній характеристиці білків різних великих молекул, включаючи рекомбінантні субодиничні вакцини, нанотіла/VHH/однодоменні антитіла (sdAbs), фрагменти антитіл, гормони/пептиди, цитокіни, фактори росту (GF), ферменти, колагени, тощо
Нормативні вимоги до N-кінцевого секвенування
Відповідно до вказівок ICH Q6B, необхідно підтвердити послідовність вашого білка та перевірити кінці на наявність будь-яких варіацій, які можуть існувати.
N Методи термінального секвенування
Аналіз |
Метод |
N-кінцеве секвенування |
Деградація Едмана, рідинна хроматографія-мас-спектрометрія (LC-MS) |
Процедури
РХ-МС
1. N-кінцеве флуоресцентне мічення білка
2. Багаторазове травлення
3. РХ-МС/мас-спектрометричний (МС) аналіз
Деградація Едмана
1. Додецилсульфат натрію (SDS) гель-електрофорез цільового білка
2. Перенесення гелю на мембрани з полівініліденфториду (PVDF) і фарбування
3. Визначте та виріжте смугу цільового білка
4. Секвенування N-кінця за Едманом
5. Аналіз даних