Yaohai Bio-Pharma пропонує послуги тестування N-термінальної секвенції та аналізу даних на основі хроматографії у рідинній фазі з масспектрометрічним детектуванням (LC-MS) або методом едманового розкладу, що дозволяє визначити амінокислоти в відповідних терміналах цікавого протеїну. LC-MS також можна використовувати для аналізу N-термінальної модифікації.
Ми брали участь у характеристиці структури протеїнів різних великочастинкових молекул, включаючи Рекомбінаційні Підодинкові Вакцини, Нанотіла/ВНН/Однодоменні Антитіла (sdAbs), Фрагменти Антитіл, Гормони/Пептиди, Цитокіни, Фактори Зростання (GF), Ензими, Колагени тощо.
Регуляторні вимоги для секвенування N-терміналу
За гідлайнами ICH Q6B необхідно підтвердити послідовність вашого білка та перевірити термінали на наявність будь-яких можливих варіацій.
Методи секвенування N-терміналу
Аналіз |
Метод |
N-термінальне визначення послідовності |
Едманів розклад, хроматографія у рідинній фазі з масспектрометрічним детектуванням (LC-MS) |
Процедур
LC-MS
1. Флуоресцентне маркування N-кінця протеїну
2. Багатократні деградації
3. Хроматографія розсіювання ліквідної фази (LC-MS) / Мас-спектрометр (MS) аналіз
Едманівська деградація
1. Електрофорез у гелі з додатком натрієвої дodeцилсульфату (SDS) для цільового протеїну
2. Перенесення гелю на мембрани полівиниліденфториду (PVDF) та їх маркування
3. Виявлення та вирізання смуги цільового протеїну
4. Едманівське секвенування N-кінця
5. Аналіз даних