Аналіз місця N-глікозиляції є важливим для розуміння функцій гліканів. Yaohai Bio-Pharma використовує Жидні Хроматографію-Мас-Спектрометрію (LC-MS) після ензимної відтинки для визначення місця N-глікозиляції.
Ми брали участь у характеристиці структури протеїнів різних великочастинкових молекул, включаючи Рекомбінаційні Підодинкові Вакцини, Нанотіла/ВНН/Однодоменні Антитіла (sdAbs), Фрагменти Антитіл, Гормони/Пептиди, Цитокіни, Фактори Зростання (GF), Ензими, Колагени тощо.
Регуляторні вимоги для місця N-глікозиляції
За угодою ICH Q6B, «для глікопротеїнів визначається вміст углеводів (нейтральних цукрів, аміносахарів і сіалових кислот). Крім того, аналізується структура ланцюгів углеводів, олигосахаридний шаблон (профіль антен) та місце глікозиляції поліпептидного ланцюга настільки повністю, наскільки це можливо».
Аналітичний метод
Аналіз |
Методи |
Сайт N-глікозилізації |
Жидкостна хроматографія-мас-спектрометрія (LC-MS) після ензиматичного розщеплення |
Процедур
1. Ензимна деградація білка трипсином або іншим протеазою
2. Відокремлення фрагментів гликопептидів
3. Підтвердження сайту N-гликозування за допомогою LC-MS
4. Аналіз даних