Аналіз сайту N-глікозилювання має вирішальне значення для розуміння функцій гліканів. Yaohai Bio-Pharma використовує рідинну хроматографію-мас-спектрометрію (LC-MS) після ферментативного розщеплення для сайту N-глікозилювання.
Ми брали участь у структурній характеристиці білків різних великих молекул, включаючи рекомбінантні субодиничні вакцини, нанотіла/VHH/однодоменні антитіла (sdAbs), фрагменти антитіл, гормони/пептиди, цитокіни, фактори росту (GF), ферменти, колагени, тощо
Нормативні вимоги до сайту N-глікозилювання
Згідно з рекомендаціями ICH Q6B, «для глікопротеїнів визначається вміст вуглеводів (нейтральні цукру, аміноцукри та сіалові кислоти). Крім того, структура вуглеводних ланцюгів, олігосахаридний малюнок (профіль антени) і сайт(и) глікозилювання поліпептидного ланцюга аналізуються якнайкраще.
Аналітичний метод
Аналіз |
Методи |
Сайт N-глікозилювання |
Рідинна хроматографія-мас-спектрометрія (LC-MS) після ферментативного розщеплення |
Процедури
1. Ферментне розщеплення білка за допомогою трипсину або іншої протеази
2. Відокремити фрагмент глікопептидів
3. Підтвердьте сайт N-глікозилювання за допомогою РХ-МС
4. Проаналізуйте дані