วันนี้ Yaohai รู้สึกตื่นเต้นมากที่จะได้แบ่งปันโปรโตคอลการถอดรหัสในหลอดทดลองสำหรับ RNA ยาว ซึ่งเป็นกลยุทธ์ที่มีประสิทธิภาพที่นักวิทยาศาสตร์มักใช้ในการผลิต RNA ในห้องแล็บ ด้วยวิธีนี้ นักวิจัยจึงสามารถผลิต RNA ยาวได้จำนวนมาก ซึ่งถือเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการศึกษาในสาขาชีววิทยาต่างๆ ที่นี่ เราจะให้คำแนะนำทีละขั้นตอนสำหรับการเตรียม RNA ยาวผ่านการถอดรหัสในหลอดทดลอง นอกจากนี้ เราจะพูดถึงวิธีที่เราจะปรับปรุงกระบวนการนี้ให้ดีขึ้น และพยายามแก้ไขปัญหาบางส่วนที่คุณเผชิญในการสังเคราะห์ RNA ยาว
การถอดรหัสในหลอดทดลองต้องมีส่วนประกอบสำคัญหลายอย่าง โดยเฉพาะ RNA ยาว คุณจะต้องเตรียมเอนไซม์ที่เรียกว่า RNA polymerase วัสดุเขียนในรูปของนิวคลีโอไทด์ไตรฟอสเฟต (NTP) บัฟเฟอร์เพื่อช่วยปฏิกิริยา และเทมเพลต DNA บางส่วน วิธีดำเนินการทีละขั้นตอน คุณสามารถดูคำแนะนำโดยละเอียดได้ที่นี่:
ปัจจัยหลายประการมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำงานที่ดีของการสังเคราะห์ RNA โดยเฉพาะอย่างยิ่งปริมาณของไอออนแมกนีเซียมในบัฟเฟอร์นั้นมีความสำคัญ RNA โพลิเมอเรสต้องการแมกนีเซียมในปริมาณมากเพื่อรองรับการโต้ตอบที่เหมาะสมกับเทมเพลต DNA และการพับตัวของ RNA ในเวลาต่อมา ประเด็นสำคัญประการที่สองที่ต้องพิจารณาคือความเข้มข้นของเทมเพลต DNA โดยเฉพาะอย่างยิ่ง คุณต้องมีปฏิกิริยากับเทมเพลต DNA เพียงพอจึงจะได้ RNA ที่ดี
แน่นอนว่า RNA ยาวจะมาพร้อมกับปัญหาต่างๆ มากมาย ปัญหาเหล่านี้อาจเกี่ยวข้องกับการสลายตัวของ RNA ส่งผลต่อการพับตัวของ RNA และโครงสร้างที่อาจขัดขวางการสังเคราะห์ RNA วิธีหนึ่งในการแก้ไขปัญหาเหล่านี้คือการปรับบัฟเฟอร์ที่คุณใช้ เพื่อให้ได้โครงสร้างของ RNA ที่ครอบคลุมมากขึ้น นักวิจัยสามารถเติมสารเคมีพิเศษต่างๆ เช่น DTT และ p-mercaptoethanol เพื่อช่วยให้ RNA พับตัวได้อย่างถูกต้องและป้องกันไม่ให้ติดกันหรือเกาะกันเป็นก้อน
นอกจากนี้ RNA ชนิดยาวทั้งหมดไม่ได้เหมือนกัน และบางชนิดอาจต้องใช้วิธีการสังเคราะห์แบบอื่น นักวิจัยอาจต้องเพิ่มคุณสมบัติพิเศษบางอย่างใน RNA เช่น การเพิ่มหาง 5 แคปหรือโพลีเอ หากจำเป็นต้องทำเช่นนี้ (ตามที่อธิบายไว้ในภายหลัง) นักวิจัยควรเพิ่มเอนไซม์อื่นๆ เช่น กัวนิลีลทรานสเฟอเรสและโพลี(เอ)โพลีเมอเรส นอกจากนี้ ยังต้องเลือกเอนไซม์โพลีเมอเรสของ RNA ที่เหมาะสม ซึ่งจะทำให้สามารถผลิต RNA ได้มากขึ้นตามธรรมชาติ เมื่อต้องสังเคราะห์ RNA ชนิดยาว เราจะต้องระบุเงื่อนไขที่ดีที่สุด
โปรโตคอลการถอดรหัส RNA ยาวในหลอดทดลองมีการใช้งานหลักๆ หลายประการสำหรับโปรโตคอลการถอดรหัส RNA ยาวในหลอดทดลองในงานวิจัย การทดสอบ และความพยายามในการบำบัดรักษาต่างๆ โปรโตคอลนี้ช่วยให้นักวิทยาศาสตร์เข้าใจโครงสร้างของ RNA วิธีการทำงานของ RNA และวิธีการปรับเปลี่ยนยีนด้วยเทคโนโลยีร่วมสมัย วันอื่นๆ - การค้นพบโรคต่างๆ และการบำบัดรักษา เช่น การบำบัดด้วย RNA ในปัจจุบัน - เชื่อเถอะว่าเทคโนโลยีการอ่านนี้มีประโยชน์ต่อการแพทย์มากเพียงใด
การใช้โปรโตคอลนี้มีข้อดีมากมาย โดยทั่วไปแล้ววิธีการที่ใช้อิเล็กโตรโฟเรซิสเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและคุ้มต้นทุนที่สุดในการผลิต RNA ยาวจำนวนมาก นอกเหนือจากคุณภาพของ RNA แล้ว ผลผลิตที่ดียังเป็นปัจจัยสำคัญที่นักวิจัยต้องคำนึงถึงเพื่อช่วยในการวิจัย โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากพวกเขาต้องการ RNA จำนวนมากสำหรับการทดลองเนื่องจากมีปริมาณอินพุตสูง นอกจากนี้ การถอดรหัสในหลอดทดลองสำหรับ RNA ยาวมักจะแม่นยำและทำซ้ำได้มากกว่าการสังเคราะห์ทางเคมีหรือการสังเคราะห์ RNA ในเซลล์
Yaohai BioPharma เป็น CDMO จุลินทรีย์ 10 อันดับแรกที่รวมโปรโตคอลการถอดเสียงในหลอดทดลองสำหรับ RNA ยาว รวมถึงกิจการด้านกฎระเบียบ เรามีระบบการจัดการคุณภาพที่สอดคล้องกับมาตรฐาน GMP ปัจจุบัน รวมถึงกฎระเบียบระดับโลก ทีมผู้เชี่ยวชาญด้านกฎระเบียบของเรามีความเชี่ยวชาญในกรอบกฎระเบียบระดับโลกเพื่อเร่งการปล่อยสารชีวภาพ เรารับประกันว่ากระบวนการผลิตจะตรวจสอบย้อนกลับได้ ผลิตภัณฑ์ที่มีคุณภาพ รวมถึงปฏิบัติตามกฎของ FDA ของสหรัฐอเมริกาและ EMA ของสหภาพยุโรป นอกจากนี้ TGA ของออสเตรเลียและ NMPA ของจีนก็พึงพอใจเช่นกัน Yaohai BioPharma ได้ผ่านการตรวจสอบในสถานที่โดยบุคลากรที่มีคุณสมบัติ (QP) ของสหภาพยุโรปสำหรับระบบคุณภาพ GMP ของเรา ตลอดจนโรงงานผลิตของเรา นอกจากนี้ เรายังผ่านการตรวจสอบการรับรองครั้งแรกของระบบการจัดการคุณภาพ ISO9001 ระบบการจัดการสิ่งแวดล้อม ISO14001 และระบบการจัดการอาชีวอนามัยและความปลอดภัย ISO45001
Yaohai Bio-Pharma ผู้ผลิตผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ 10 อันดับแรก เป็นผู้เชี่ยวชาญด้านการหมักด้วยจุลินทรีย์ เราได้จัดตั้งโรงงานขั้นสูงที่มีสิ่งอำนวยความสะดวกที่ทันสมัยและความสามารถในการผลิต RD ที่แข็งแกร่ง เรามีสายการผลิตสารออกฤทธิ์ 100 สายที่ปฏิบัติตามข้อกำหนด GMP สำหรับการหมักและการทำให้บริสุทธิ์ด้วยจุลินทรีย์ รวมถึงสายการผลิตและขั้นตอนสุดท้าย 500 สายที่ทำงานอัตโนมัติสำหรับตลับบรรจุ ขวดยา และเข็มฉีดยาที่บรรจุยาไว้ล่วงหน้า ขนาดการหมักที่มีจำหน่ายมีตั้งแต่ 1000L ถึง 2000L, 1L และ 25L โปรโตคอลทรานสคริปต์ในหลอดทดลองสำหรับ RNA ยาวสำหรับ vias มีตั้งแต่ 1 มล. ถึง 3 มล. ในขณะที่เข็มฉีดยาที่บรรจุยาไว้ล่วงหน้าและข้อกำหนดการบรรจุตลับบรรจุมีตั้งแต่ XNUMX-XNUMX มล. โรงงานผลิตของเราเป็นไปตาม cGMP และรับประกันการจัดหาตัวอย่างทางคลินิกและสินค้าเชิงพาณิชย์อย่างสม่ำเสมอ โรงงานของเราผลิตโมเลกุลขนาดใหญ่ซึ่งจัดส่งไปทั่วโลก
Yaohai Bio-Pharma มีประสบการณ์ในการผลิตผลิตภัณฑ์ชีวภาพที่สร้างจากจุลินทรีย์ เรานำเสนอโซลูชัน RD เฉพาะทาง รวมถึงบริการด้านการผลิตพร้อมลดความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นให้เหลือน้อยที่สุด เราใช้เทคนิคที่หลากหลาย เช่น ซับยูนิตเซลล์แบบรีคอมบิแนนท์ วัคซีน (รวมถึงเปปไทด์) ปัจจัยการเจริญเติบโต ฮอร์โมน และโปรโตคอลทรานสคริปต์ในหลอดทดลองสำหรับอาร์เอ็นเอยาว เราเป็นผู้เชี่ยวชาญด้านจุลินทรีย์หลายชนิด เช่น การหลั่งของยีสต์นอกเซลล์และภายในเซลล์ (ให้ผลผลิตสูงถึง 15 กรัมต่อลิตร) และแบคทีเรียที่ละลายน้ำได้ภายในเซลล์ และอินคลูชันบอดี (ให้ผลผลิตสูงถึง 10 กรัมต่อลิตร) นอกจากนี้ เรายังพัฒนาแพลตฟอร์มการหมัก BSL-2 เพื่อสร้างวัคซีนแบคทีเรีย เรามีประสบการณ์ในการปรับปรุงกระบวนการผลิต ส่งผลให้ผลผลิตเพิ่มขึ้นและลดต้นทุน เรามีทีมเทคโนโลยีที่มีประสิทธิภาพสูงเพื่อให้แน่ใจว่าจะส่งมอบโครงการได้ตรงเวลาและมีคุณภาพสูง ซึ่งช่วยให้เราสามารถนำผลิตภัณฑ์ที่เป็นเอกลักษณ์ของคุณออกสู่ตลาดได้เร็วขึ้น
Yaohai Bio-Pharma เป็นผู้นำในโปรโตคอลทรานสคริปต์ในหลอดทดลองสำหรับ Long RNA CDMO โดยเราเน้นการผลิตวัคซีนจุลินทรีย์และการบำบัดรักษาสำหรับสัตว์เลี้ยง มนุษย์ และสัตวแพทย์เป็นหลัก เรามีแพลตฟอร์มเทคโนโลยี RD และการผลิตที่ล้ำสมัยซึ่งครอบคลุมกระบวนการผลิตทั้งหมดตั้งแต่การออกแบบสายพันธุ์จุลินทรีย์ ไปจนถึงการประมวลผลและออกแบบวิธีการจัดเก็บเซลล์ ไปจนถึงการผลิตทางคลินิกและเชิงพาณิชย์ ทำให้มั่นใจได้ว่าเราจะสามารถส่งมอบโซลูชันขั้นสูงที่สุดได้สำเร็จ เรามีความรู้มากมายในด้านการประมวลผลทางชีวภาพของจุลินทรีย์ โครงการกว่า 200 โครงการเสร็จสมบูรณ์แล้ว และเราช่วยให้ลูกค้าของเราปฏิบัติตามกฎระเบียบ เช่น กฎระเบียบของ FDA ของสหรัฐอเมริกา รวมถึง EMA ของสหภาพยุโรป นอกจากนี้ เรายังช่วยให้ลูกค้าสามารถดำเนินการตาม TGA ของออสเตรเลียและ NMPA ของจีนได้ เราสามารถตอบสนองความต้องการของตลาดได้อย่างรวดเร็วและเสนอบริการ CDMO ที่กำหนดเองได้เนื่องจากประสบการณ์และความเชี่ยวชาญของเรา