Сегодня Yaohai так волнительно делится своим протоколом транскрипции in vitro для длинной РНК. Это эффективная стратегия, которую ученые часто используют для получения РНК в лаборатории. Таким образом, исследователи могут производить значительно большее количество длинной РНК — что необходимо для изучения в различных биологических областях. Здесь мы предоставляем пошаговое руководство по получению длинных РНК с помощью транскрипции in vitro. Мы также поговорим о том, как мы могли бы улучшить этот процесс, и попытаемся решить некоторые проблемы, с которыми вы сталкиваетесь при синтезе длинной РНК.
Для транскрипции In vitro требуется несколько основных компонентов, особенно длинная РНК. Вам нужно будет предоставить фермент, называемый РНК-полимеразой, материал для записи в форме нуклеотидтрифосфатов (NTP), буфер для содействия реакции и некоторую ДНК-матрицу. Как это сделать шаг за шагом, вы можете найти подробное руководство здесь:
Несколько факторов очень важны для хорошей работы синтеза РНК. В частности, важно количество ионов магния в самом буфере. РНК-полимераза требует значительного количества магния для поддержания надлежащего взаимодействия с шаблоном ДНК и последующего сворачивания РНК. Вторым важным аспектом, который следует учитывать, является концентрация шаблона ДНК. В частности, у вас должно быть достаточно реакции шаблона ДНК, чтобы получить хороший выход РНК.
Длинная РНК, конечно, будет иметь свой собственный набор проблем. Эти проблемы могут быть связаны с распадом РНК, влиять на то, как РНК сворачивается, и создавать структуры, которые потенциально мешают синтезу РНК. Один из способов решения этих проблем — подстройка буфера, который вы принимаете. Для более полной структуры РНК исследователи могут добавлять различные специальные химикаты, такие как DTT и p-меркаптоэтанол, чтобы помочь РНК правильно сворачиваться и предотвратить ее слипание или комкование.
Кроме того, не все типы длинных РНК одинаковы, и некоторые могут потребовать альтернативных методов синтеза. Существуют особые особенности, которые исследователям может потребоваться добавить в РНК, например, добавление 5-колпачка или поли-А-хвоста. Если это необходимо (как объясняется далее), то исследователи должны включить другие ферменты, такие как гуанилилтрансфераза и поли(А)полимераза. Также необходимо выбрать подходящий фермент РНК-полимеразу, который естественным образом позволяет им производить больше РНК. Как только должна быть синтезирована длинная РНК, нам нужно будет определить наилучшие условия.
Длинные РНК in vitro транскриптСуществует ряд ключевых применений для длинного РНК in vitro транскрипта протокола в нескольких исследовательских, аналитических и терапевтических начинаниях. Он помогает ученым понять структуру РНК, как она работает и как они могут модифицировать гены с помощью современных технологий. Еще в другой день — открытие различных заболеваний и их терапии, таких как очень современные РНК-терапии — давайте поверим, насколько полезной может быть эта технология чтения для медицины.
Использование этого протокола имеет множество преимуществ. Метод на основе электрофореза, как правило, является наиболее эффективным и экономичным способом получения больших количеств длинной РНК. Помимо качества РНК, хороший выход также является важным фактором для исследователей, помогающим им в их исследованиях, особенно если им нужны большие количества РНК для экспериментов из-за высокого входного материала для начала. Кроме того, транскрипция in vitro для длинной РНК, как правило, более точна и воспроизводима, чем химический синтез или клеточный синтез РНК.
Yaohai BioPharma входит в десятку лучших микробных CDMO, которые включают протокол транскрипции In vitro для длинной РНК, а также вопросы регулирования. У нас есть система управления качеством, которая соответствует текущим стандартам GMP, а также мировым нормам. Наша команда экспертов по регулированию имеет опыт работы в глобальных нормативных рамках для ускорения биологических запусков. Мы обеспечиваем прослеживаемость производственных процессов, качественную продукцию, а также соответствие правилам FDA США и EMA ЕС. Австралийское TGA и китайское NMPA также удовлетворены. Yaohai BioPharma успешно прошла аудит на месте квалифицированного лица (QP) Европейского союза для нашей системы качества GMP, а также нашего производственного объекта. Кроме того, мы прошли первые сертификационные аудиты системы менеджмента качества ISO10, системы экологического менеджмента ISO9001 и системы менеджмента охраны труда и техники безопасности ISO14001.
Yaohai Bio-Pharma, входящая в десятку крупнейших производителей биологических продуктов, специализируется на микробной ферментации. Мы создали передовое предприятие, оснащенное современным оборудованием и мощными производственными возможностями для научных исследований. У нас есть пять линий по производству лекарственных веществ, которые соответствуют требованиям GMP для микробной ферментации и очистки, а также две линии розлива и финишной обработки, которые автоматизированы для картриджей, флаконов и предварительно заполненных шприцев. Доступные масштабы ферментации варьируются от 10 л до 100 л, 500 л и 1000 л. Протокол транскрипта in vitro для длинных РНК для отверстий составляет от 2000 мл до 1 мл, тогда как спецификации наполнения предварительно заполненных шприцев и картриджей охватывают 25-1 мл. Наш производственный цех соответствует требованиям cGMP и гарантирует стабильную поставку клинических образцов, а также коммерческих товаров. Наш завод производит большие молекулы, которые отправляются по всему миру.
Yaohai Bio-Pharma имеет опыт в производстве биопрепаратов, созданных из микроорганизмов. Мы предлагаем индивидуальные решения в области исследований и разработок, а также производственные услуги, сводя к минимуму потенциальные риски. Мы работали с различными технологиями, такими как рекомбинантные клеточные субъединицы, вакцины (включая пептиды), факторы роста, гормоны и протокол транскрипта In vitro для длинной РНК. Мы являемся специалистами по многим микроорганизмам, таким как внеклеточная и внутриклеточная секреция дрожжей (выход до 15 г/л) и внутриклеточные растворимые бактерии и тельца включения (выход до 10 г/л). Мы также разработали платформу ферментации BSL-2 для создания бактериальных вакцин. У нас есть опыт улучшения производственных процессов, тем самым увеличивая выход и снижая затраты. У нас есть высокоэффективная технологическая команда, которая обеспечивает своевременную и качественную доставку проектов. Это помогает нам быстрее выводить на рынок ваши уникальные продукты.
Yaohai Bio-Pharma является лидером в области протокола транскрипта in vitro для длинной РНК CDMO. Нашей основной задачей является производство микробных вакцин и терапевтических средств для лечения домашних животных, людей и животных. Мы обладаем передовыми платформами научно-исследовательских и производственных технологий, которые охватывают весь процесс производства от разработки микробных штаммов до обработки и разработки методов создания банков клеток, клинического и коммерческого производства, что гарантирует успешную поставку самых передовых решений. Мы накопили огромный объем знаний в области биообработки микробов. Более 200 проектов были успешно завершены, и мы помогаем нашим клиентам соблюдать такие правила, как правила FDA США и EMA ЕС. Мы также помогаем им ориентироваться в австралийском TGA и китайском NMPA. Мы способны быстро реагировать на требования рынка и предлагать индивидуальные услуги CDMO благодаря нашему опыту и знаниям.