Alle Kategorier
ENEN
Tag-frie Protein Preparation Services

Tag-frie Protein Preparation Services

Hjem >  Tag-frie Protein Preparation Services

Tag-frie Protein Preparation Services

Proteinmerker, som fusjonspartnere brukt i rekombinante DNA-teknologier, muliggjør effektiv, enkelt-trinns affinitetsrensing for ulike proteiner/peptider med ulike egenskaper. Til tross for denne viktige fordelen, kan tagger som eksogene aminosyrer endre proteinstrukturen og biologiske funksjoner. Derfor er ikke-merkede (tag-frie) proteiner eller peptider mer foretrukket for å sikre sikkerhet og effekt, spesielt innen det biofarmasøytiske feltet. Et rekombinant protein med en fusjonsmerke har begrensede muligheter for å få autorisasjon fra medisinske/legemiddeladministrasjonsorganer.

Basert på den mikrobielle biologiske FoU-plattformen, tilbyr Yaohai Bio-Pharma skreddersydde ikke-merkede (Tag-fri) proteinpreparattjenester dedikert til å møte unike mål for forskning, utvikling og produksjon for klinisk bruk.

Nøkkelord: tag-fri proteinproduksjon, ikke-merket proteinrensing, gratis tag-basert proteinpreparat, tagless proteinekspresjon og rensing, svært tag-fri målprotein Anvendelse: humanmedisinsk forskning, dyremedisinutvikling, rekombinant vaksineutvikling, rekombinant stort molekyl produksjon av biologiske stoffer


Vår mikrobielle FoU-plattform

Vi har erfaring med mikrobiell stammeteknikk, fermentering og produktrensing.

Bakterier: Escherichia coli (E. coli)

Gjær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Tilpassede alternativer

Modalitet Rekombinant protein
Utgangsmaterialer Gensekvenser, rekombinant plasmid eller konstruerte stammer
leveransen Rens: >80 %, >85 %, >90 % Mengde: 0.2~10 g (bestemmes av prosjektet)
Uttrykkssystem og formasjon E. coli periplasmatisk sekresjon, løselig og inklusjonskroppsuttrykk; Gjær intracellulært eller sekresjonsuttrykk
Analysemetoder Ultrafiolett (UV), bicinchoninsyreanalyse (BCA), Bradford eller Lowry for QuantityNatriumdodecyl-sulfat polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE) for rensetesting Valgfritt: Western blot (WB), enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA), høy ytelse væskekromatografi (HPLC)
Resterende urenheter Endotoksin (valgfritt)

Tjenestedetaljer

Tjenester Tjenestedetaljer Minimal tidslinje (arbeidsdag)
Gensyntese Kodonoptimalisering for spesifikk ekspresjonsvert 7 ~ 10 dager
Gensyntese
Plasmid/vektorkonstruksjon Kloning inn i plasmid/vektor 2 dager
Plasmid transformasjon
Verifikasjon av polymerasekjedereaksjon (PCR), restriksjonsenzymfordøyelse, gensekvensering 3 dager
Proteinuttrykk i E. coli Plasmid transformasjon, 2 dager
Dyrking i ristekolbe 3 dager
7L-sacle gjæring, optimalisering 4 dager / batch
Tag-fri proteinrensing, optimalisering 5 ~ 10 dager / batch
Testing med natriumdodecyl-sulfat polyakrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE)
Proteinuttrykk i gjær Klargjøring av gjærkompetente celler 4 dager
Plasmidlinearisering og elektrotransformasjon
7L-sacle gjæring, optimalisering 5 dager
Tag-fri proteinrensing, optimalisering 7 dager / batch
Tag-fri proteinrensing 5 ~ 10 dager / batch
QC av SDS-PAGE

Tilleggstjenester (valgfritt)

Utvikling av fermenteringsprosess

Tag-fri proteinrensingsprosessutvikling

Pilotoppskalering og GMP-produksjon

Analyse og testing

Våre funksjoner

Vi har jobbet med mer enn 300 konstruerte mikrobielle stammer, inkludert E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink stamme 1/2/3/4; og H. polymorpha.

Vi har erfaring med E. coli periplasmatisk sekresjon, løselig og inklusjonskroppsekspresjon, samt intracellulær gjær eller sekresjonsekspresjon.

Vi etablerer en screeningsplattform med høy gjennomstrømning for å screene høyproduserende og stabile stammer fra over hundre kandidatstammer.

Få et gratis tilbud

Kontakt oss