mRNS ir plaši izmantota gēnu vai olbaltumvielu funkciju izpētē. Tikmēr tas ir izplatīts profilaktisko un terapeitisko bioloģisko līdzekļu izstrādē. Kā izplatīta RNS molekulu sintēzes stratēģija in vitro transkripcija (IVT) ļauj mums efektīvi iegūt pielāgotus transkriptus.
Uzņēmums Yaohai Bio-Pharma ir izveidojis mRNS sintēzes tehnoloģiju kopumu, lai nodrošinātu augstas kvalitātes RNS, piemēram, secību izstrādi un optimizāciju, IVT, attīrīšanu, liofilizāciju un lipīdu nanodaļiņu (LNP) iekapsulēšanu. Visi produkti tiek izlaisti saskaņā ar stingriem kvalitātes kontroles (QC) standartiem.
Līdz ar COVID-19 pandēmijas uzliesmojumu 2020. gadā mRNS tehnoloģija ir attīstījusies ar lēcieniem un robežām, un ar to saistītie pētījumi un pielietojumi ir guvuši nebijušu attīstību, tostarp profilaktiskās vakcīnas infekcijas slimību profilaksei, terapeitiskās onkoloģijas vakcīnas un medikamenti, audzēju terapija, proteīnu terapija. aizstājterapija, reģeneratīvā medicīna un šūnu un gēnu terapija (CGT).
mRNS vakcīna | mRNS terapija |
|
Process | Izvēles pakalpojums | Informācija par pakalpojumu | Piegādes periods (darba diena) | Piegādājams |
mRNS sekvences dizains un optimizācija | Kodēšanas secību projektēšana un optimizācija | CDS sekvences dizains un kodonu optimizācija | 1-3 | Secības fails |
Nekodējošo secību projektēšana un optimizācija | UTR, polyA secību projektēšana un optimizācija | |||
Transkripcijas veidnes plazmīdu sagatavošana | Rekombinantās plazmīdas preparāts | Gēnu sintēze | 7-10 | |
Plazmīdu pastiprināšana un ekstrakcija | 4 | |||
Plazmīdu linearizācija un attīrīšana | ||||
mRNS In vitro transkripcija | Koptranskripcijas ierobežojums (vienpakāpes metode) | In vitro transkripcija (IVT) / Cap analog | 1-2 | N / A |
Nukleotīdu modifikācijas (UTP/CTP modifikācijas) | ||||
DNS veidnes noņemšana (DNāze I) | ||||
Enzīmu ierobežošana (divpakāpju process) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotīdu modifikācijas (UTP/CTP modifikācijas) | ||||
DNS veidnes noņemšana (DNāze I) | ||||
mRNS attīrīšana (litija hlorīds/magnētiskās lodītes) | ||||
Enzīmu ierobežošana | ||||
mRNS attīrīšana | Tradicionālā attīrīšanas shēma | Litija hlorīda nokrišņi | 1 | mRNS zāļu viela |
Magnētisko lodīšu attīrīšana | ||||
Hromatogrāfijas kolonnas attīrīšanas shēma | Vairāku hromatogrāfijas metožu kombinācija | 1-2 | ||
Bufera apmaiņa | Ultrafiltrācija | 1 | ||
mRNS liofilizācija | Liofilizācija | Iepriekšēja sasaldēšana | 2-3 | mRNS liofilizēts pulveris |
Primārā žāvēšana (sublimācija) | ||||
Sekundārā žāvēšana (desorbcija) | ||||
mRNS iekapsulēšana | LNP iekapsulēšana | LNP iekapsulēšana | 2-3 | mRNS-LNPDrug produkts |
Koncentrācija un bufera apmaiņa | ||||
mRNS kvalitātes analīze | mRNS zāļu viela/liofilizēts pulveris | Koncentrācija, tīrība | 1 | Testa ziņojums |
Integritāte, ierobežošanas efektivitāte, poliA astes sadalījums | 2-5 | |||
mRNS-LNP zāļu produkts | Iekapsulēšanas efektivitāte | 1 | ||
Daļiņu izmērs un sadalījums | ||||
Virsmas lādiņš | ||||
mRNS ekspresijas validācija | 293T šūnu novērtējums | Šūnu apšuvums | 4 | |
Pārejoša šūnu transfekcija | ||||
Fluorescences signāla novērošana | 1-3 | |||
Western blot (WB) / ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA) |
5' Cap | ▪ Bez vāciņa ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, enzīmu ierobežošana |
5' UTR/3' UTR | ▪ Dabas UTR secība ▪ Mutants/Inženierizēta UTR secība |
3' PolyA Tail | ▪ 100A ~ 120A astes (ieteicams) ▪ Segmentēta poliA aste ▪ Citas pielāgotas astes |
Modificēti nukleozīdi | ▪ Nemodificētas bāzes ▪ Pseidouridīns (Ψ) ▪ N1-metilpseudouridīns (N1Ψ) ▪ 5-metilcitozīns (m5C) ▪ 5-metiluridīns (m5U) ▪ 5-metoksiuridīns (5 moU) ▪ 2-tiouridīns (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Citas modifikācijas |
Integrētā pakalpojumu plūsma
Nodrošiniet virkni pakalpojumu, sākot no priekšgala secību izstrādes līdz aizmugures mRNS sagatavošanai, kvalitātes kontrolei un ekspresijas validācijai.
Starptautiska progresīva secību izstrāde un optimizācija
Profesionāla mRNS sekvences dizains un optimizācija veicina efektīvu mRNS ekspresiju.
Daudzveidīgas nukleotīdu modifikācijas
Efektīvi palieliniet mRNS ekspresiju un samaziniet mRNS nelabvēlīgās imūnās atbildes.
Nobriedusi attīrīšanas platforma
Apvienojot parasto un pašu izstrādātu attīrīšanas metodi, mRNS paraugus iegūst ar augstu tīrības pakāpi.
Pilnīga kvalitātes kontroles platforma
Bagātiniet kvalitātes kontroles iespējas, lai tās atbilstu ikdienas pārbaužu prasībām, piemēram, koncentrācijai, A260/280 tīrībai un integritātei, kā arī augstas kvalitātes kontroles prasībām, piemēram, ierobežošanas efektivitātei/poliA sadalījumam.
Fast Piegāde
Pielāgotu mRNS var piegādāt pat 7 dienu laikā, izņemot ārpakalpojumu sekvences sintēzi.