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アミノ酸の酸化

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アミノ酸の酸化

組み換えタンパク質では、トリプトファン (Trp) やメチオニン (Met) などの露出したアミノ酸側鎖が酸化されることが多く、タンパク質の物理化学的特性が変化します。これらの変化は、結合の喪失、酵素活性の低下、予想外の急速なクリアランスなど、影響を受けるタンパク質の生物学的機能の変化に寄与する可能性があります。タンパク質は酸化剤と急速に反応し、細胞、細胞外組織、体液に豊富に存在するため、酸化反応の重要なターゲットです。

したがって、バイオ医薬品の開発を成功させるには、タンパク質の酸化を監視することが重要です。

Yaohai Bio-Pharma は、液体クロマトグラフィー質量分析法 (LC-MS) によってアミノ酸の酸化を判定できるアミノ酸酸化分析サービスを提供しています。

当社は、組み換えサブユニットワクチン、ナノボディ/VHH/シングルドメイン抗体（sdAbs）、抗体フラグメント、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子（GF）、酵素、コラーゲンなど、さまざまな巨大分子のタンパク質構造特性評価に携わってきました。

アミノ酸酸化に関する規制要件

ICH Q6B ガイドラインによれば、酸化形態はクロマトグラフィー、電気泳動、および/またはその他の関連する分析方法 (例: 高速液体クロマトグラフィー (HPLC)、キャピラリー電気泳動、質量分析、円二色性) によって検出および特徴付けられる場合があります。

分析手順
分析 メソッド
アミノ酸の酸化 LC-MS、逆相高速液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）または疎水性相互作用クロマトグラフィー高速液体クロマトグラフィー（HIC-HPLC）および質量分析
分析手順

1. サンプルの準備

2. LC-MS

3 データ分析

トリプトファン (Trp) 残基は、芳香族インドールと活性酸素種との反応性が高いため、特に酸化されやすい傾向があります。Trp の酸化には、通常タンパク質の 3 次元構造に埋め込まれている Trp 残基の一部を露出させる必要があります。

しかし、Trp 残基が酸化されると、元の Trp とは非常に異なる特性を持つさまざまな生成物に変化する可能性があります。Trp 酸化の最も一般的な経路には、N-ホルミルキヌレニン (質量差: +32) の形成が含まれます。

よく酸化される別のアミノ酸はメチオニンです。Met 残基の硫黄原子は 16 個または 32 個の酸素原子を受け入れることができ、それぞれスルホキシド (質量差: +XNUMX) またはスルホン (質量差: +XNUMX) を形成します。この修飾は、Met が通常高い表面露出を持つため、比較的よく見られます。

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