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アミノ酸の脱アミド化

アミノ酸の脱アミド化

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アミノ酸の脱アミド化

グルタミンとアスパラギン側鎖の脱アミド化は、タンパク質バイオ医薬品の特性への影響という点では一般的な変更です。脱アミド化はグルタミン残基で発生することがありますが、通常ははるかに低い速度で発生します。脱アミド化速度は、温度、pH、局所的なタンパク質構造、および隣接するアミノアシル残基によって影響を受けます。

Yaohai BioPharma は、液体クロマトグラフィー質量分析法 (LC-MS) によってアミノ酸の脱アミド化を検出できるアミノ酸脱アミド化テスト サービスを提供しています。

当社は、組み換えサブユニットワクチン、ナノボディ/VHH/シングルドメイン抗体（sdAbs）、抗体フラグメント、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子（CF）、酵素、コラーゲンなど、さまざまな巨大分子のタンパク質構造特性評価に携わってきました。

アミノ酸脱アミド化に関する規制要件

ICH Q6B ガイドラインによれば、脱アミド化形態はクロマトグラフィー、電気泳動、および/またはその他の関連する分析方法によって検出され、特徴付けられる可能性があります。

分析手順
分析 メソッド
脱アミド化 液体クロマトグラフィー-質量分析（LC-MS）
手順

例えば、アスパラギン酸の脱アミド化

1. 酵素消化

2. 高速液体クロマトグラフィー（HPLC）条件下でのLC-MS

3 データ分析

アスパラギンの脱アミド化は、ラセミ化および加水分解の影響を受けやすいスクシンイミド中間体 (Suc) を介して起こり、L-Asp、L-IsoAsp、D-Asp、および D-IsoAsp の 4 つの Asp 異性体が生成されます。

理論的には、Gln 脱アミド化は Asn 脱アミド化と同様のプロセスを通じて 4 つの対応する Glu 異性体を生成する可能性があります。

高分解能質量分析により、Asn/Gln 含有ペプチドとそれに対応する脱アミド化された Asp/Glu 間の 1 Da の質量差を簡単に識別できます。

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