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N-グリカンプロファイリング

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微生物CDMO

N-グリカンプロファイリング

N-グリカンのプロファイリングはバイオ医薬品の生産において重要です。ヤオハイバイオファーマでは、遊離およびラベル付けされたグリカンを用いた液状クロマトグラフィー-質量分析法（LC-MS）によるN-グリカンプロファイリングサービスを提供しています。N-グリカンサンプルの準備における一般的な手順には、糖タンパク質（GP）の分解、脱糖化、精製、ラベリング／誘導体化、および固体相抽出（SPE）が含まれます。

私たちは、再構成サブユニットワクチン、ナノボディ/VHH/単一ドメイン抗体（sdAbs）、抗体断片、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子（GF）、酵素、コラーゲンなどを含む様々な大型分子のタンパク質構造特性評価に携わってきました。

N-グリカンプロファイリングに関する規制要件

ICH Q6Bガイドラインによると、「グリコタンパクの場合、炭水化物含量（中性糖、アミノ糖およびサリル酸）が決定される。さらに、炭水化物鎖の構造、オリゴ糖パターン（アンテナプロフィール）、およびポリペプチド鎖のグリコシレーション部位が可能な範囲で解析される」とあります。

分析方法
分析 方法
N-グリカンプロファイリング 遊離およびラベル付けされたグリカンの液相クロマトグラフィー-質量分析 (LC-MS)
手続き

1. ペプチドN-グリコシダーゼF (PNGase F) を用いた酵素によるグリカン遊離

2. 遊離グリカンの2-アミノベンザミド (2-AB) による誘導体化

3. 大量の界面活性剤、非揮発性塩類、または自由アミノ基を持つ物質が存在する場合、収集されたN-グリカンをTSK アミド - 80カラム上で精製

4. 蛍光2-アミノベンザミド (2-AB) によるラベリング

5. ラベル付けされたN-グリカンのLC-MS分析

6 について データ分析

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