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アミノ酸の酸化

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アミノ酸の酸化

再構成タンパク質では、トリプトファン（Trp）やメチオニン（Met）などの露出したアミノ酸側鎖の酸化がよく見られ、タンパク質の物理化学的性質が変化します。これらの変化は、影響を受けたタンパク質の生物学的機能を変える原因となり得ます。例えば、結合能の喪失、酵素活性の低下、予期しない速やかな代謝などです。タンパク質は、細胞内、細胞外組織、体液に豊富に存在し、酸化剤と迅速に反応するため、酸化反応の重要な標的となります。

したがって、タンパク質の酸化を監視することは、バイオ医薬品開発において極めて重要です。

陽海バイオファーマは、液体クロマトグラフィー-質量分析法（LC-MS）を用いたアミノ酸酸化解析サービスを提供しており、これによりアミノ酸の酸化を決定することができます。

私たちは、再構成サブユニットワクチン、ナノボディ/ VHHs/単一ドメイン抗体（sdAbs）、抗体断片、ホルモン/ペプチド、サイトカイン、成長因子（GF）、酵素、コラーゲンなど、さまざまな大分子のタンパク質構造解析に携わってきました。

アミノ酸酸化に関する規制要件

ICH Q6Bガイドラインによれば、酸化形態はクロマトグラフィー、電気泳動および/または他の関連する分析方法（例：高出力液体クロマトグラフィー（HPLC）、キャピラリ電気泳動、質量分析法、円二色性）によって検出され、特徴づけられるかもしれません。

分析方法
分析 方法
アミノ酸の酸化 LC-MS、逆相高出力液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）または疎水相互クロマトグラフィー高出力液体クロマトグラフィー（HIC-HPLC）および質量分析法
分析手順

1. サンプルの準備

2. LC-MS

3. データ解析

トリプトファン（Trp）残基は、特に酸化的修飾を受けやすいです。これはアロマティックインドールが反応性酸素種と高い反応性を持つためです。Trpの酸化には、通常タンパク質の三次元構造の中で埋もれているTrp残基が何らかの形で露出することが必要です。

しかし、Trp残基が酸化されると、元のTrpとは非常に異なる特性を持つさまざまな生成物に変換される可能性があります。Trpの酸化の最も一般的な経路には、N-ホルミルキヌレニンの形成が含まれます（質量差: +32）。

別のよく酸化されるアミノ酸はメチオニンです。Met残基内の硫黄原子は、1つまたは2つの酸素原子を受け取ることで、それぞれスルフォキシド（質量差: +16）またはスルホン（質量差: +32）が形成されます。この修飾は、通常Metが表面に露出しているため、比較的一般的です。

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