A lejjebb a folyamatban (DSP) fejlesztés jelentősége
Az egész fermentációs tejszín tartalmazza a célfényt vagy plazmidot, valamint a termék- és folyamatkapcsolatos szennyezőanyagokat, például az agglomerátumokat, a mikrobiológiai sejtes anyagokat, a Vágyon Sejt Fehérjét (HCP), a Vágyon Sejt DNS-t (HCD), az endotoxint és antibiotikumokat.
Ezért döntően fontos egy hatékony DSP, tisztítási folyamat tervezése, hogy bizonyos szennyezőanyagokat távolítsuk el, és nagyon tisztított és minőséges gyógyszertanyagot termeljünk. Emellett a tisztítási folyamat optimalizálása segíthet a termék visszakeresésének növelésében, a költségek csökkentésében, valamint a folyamat méretezhetőségének és ismétlhetőségének javításában.
Kulcsszavak: folyamatfejlesztés, optimalizálás és validáció, tisztítási folyamat, kromatográfia, szennyezékek eliminálása, HCP eltávolítás, HCD távolítás, endotoxina távolítás, fehérje denatúrálás és refoldolás, VLP gyüjtés, konjugálás
Alkalmazás: biogyermedési ipar, emberi orvosság, állati orvosság, vakcina, rekombinált nagy molekula-biológikumok, rekombinált biológikumok, biológiai reagens
Yaohai Bio-Pharma DSP Megoldások
Részletes tapasztalattal rendelkezünk célfehérjék vagy plázmidok izolálásában összetett mátrixokból a tisztítási folyamat fejlesztésével és optimalizálásával. Különböző típusú egységműveletek alkalmasak biológikumok tisztítására, beleértve a centrifugálást, szűrését, homogenizálást, alkali lizist, ultrafiltraszt, sedimentációt, fehérje denatúrálását és refoldolását, kromatográfiát stb.
A rendelkezésre álló tisztítási fejlesztési szolgáltatásaink közé tartozik:
- Az egész tisztítási folyamat fejlesztése cella vagy szupernansz gyűjtésétől az utolsó aktív anyagig.
- A tisztítási folyamat optimalizálása a termék- és folyamatkapcsolatos szennyezések alapján a termék minőségének és biztonságának növelése érdekében, például: HCP, HCD, endotoxin.
- Kulcsparaméterek meghatározása és optimalizálása egy vagy több egységműveletben, beleértve a sejtlyukasítást, az irányított áramfolyásos szűrést, a rezenszűrés, kromatográfiát, fehérje deformációját és újragyujtását stb.
- A folyamat optimalizálása minőség, hozam, visszaállítás, költség és skálázhatóság szempontjából.
- A leforgató tisztítási folyamat ellenőrzése.
- Kockázatalapú paramétertartomány-vizsgálat és Tervek Kísérletezés (DoE) a folyamatmodellezés során.
Szolgáltatás részletei
Szabványos fehérje vagy plazmid tisztítási platformok több nyers tisztítási lépésre alapoznak, és kevesebb, mint 4 kromatográfiai lépésre, beleértve a rögzítést, köztes tisztítást és finomítást.
| Szolgáltatás részletei |
Egységműveletek |
Paraméterek |
| Nyers tisztítás |
Centrifugális elválasztás |
Forgásszám, Idő |
| Magas nyomású homogenizálás |
Teljes szilárd anyag, Nyomás, Ciklusok |
| Folyamatos alkalin lizezés |
Az újra feloldott sejt és a lizezési megoldás aránya, Lizezési idő |
| Tangenciális folyamatú szűrődés |
Membránanyag és por méret, Áramlási sebesség, Transzmembránnyomás (TMP), A szűrő térfogat és a membrán terület aránya |
| Kiesztetés |
Kiesztető típusa és koncentrációja, Additív, pH, Hőmérséklet, Idő |
| Denatúrálás és újraforgalmazás |
Inklúziós test fehérje oldhatóságának növelése |
Denatúráló koncentráció (pl., Urea, Guanidin-HCl, Erős Ioni Detergensen), Detergensek (pl., Sodium dodecyl sulfate, SDS), Oxidációs ügynökök (pl., Dithiothreitol, DTT), Chelátáló ügynökök (Ethylenediaminetetraaceton sav, EDTA), Hőmérséklet, Idő |
| Féhérjének újragördítése |
Újragördítési módszerek (ritkítás, dialízis vagy SEC újragördítés), Féhérjekoncentráció, Pufferzetek, pH, Hőmérséklet, Idő, Oxidációs és redukáló ügynökök (pl., Glutathion, GSH/Oxidált glutathion, GSSH, DTT/GSSH, Cisztein/Ciszín), Kis molekulás additívumok (L-arginin, Urea, Guanidin/HCl, és detergensek) |
| Ragadás, Köztes Tisztítás és Fineszkodás |
AC (Affinitásos Kromatográfia) |
Többféle kromatográfiai rezzeny/oszlop (pl., AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Oszlop hossza és átmérője, Puffer összetétel, Bevitt térfogat, Móbil fázis összetétele (Adszcipció és Deszcipció), pH, Áramlási sebesség, Ragadás, Mosás és Elütés feltételei. |
| IEX (Anió- vagy Kationcsere Kromatográfia) |
| HIC (Hidrofób Interakció Kromatográfia) |
| Kifosztogatás és/vagy méretkizációs kromatográfia (SEC) |
| RPC (Reversed Phase Chromatography) |
| MMC, keverék módú kromatográfia |
Esettanulmány
ESET 1
Megbízást kapunk a folyamatok alulján történő szivacsító folyamat fejlesztésére és optimalizálására annak érdekében, hogy növeljük a fehérje szivacsosságát 85%-ról 90%-ra, miközben csökkentjük a kromatográfiai lépéseket.
Yaohai egy robosztus és skálázható szivacsítási folyamatot adott ki három kromatográfiai lépéssel a célféhérjére, egy baktérium allergénre. A végső szivacsosság 95%-ot ért el.
ESET 2
Yaohai megbíztatta ügyelőink a vírusféle részecskés (VLP) oltás végzetes anyagának távolítási folyamatának optimalizálásával.
A csapataink kromatográfiai paramétereket optimalizáltak, és egy 98%-os szivacsossággal és 12,8EU/mg végső endotoxinnal rendelkező gyógyszervanyagot előállítottak.
Tapasztalataink
- Részt vettünk különböző nagy molekula fejlesztésében és gyártásában, beleértve a rekombinánszubunit oltószereket, VLP-eket, hormonokat (insulin, GLP-1, növekedési hormon), citokinokat (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), növekedési tényezőket (EGF, FGF, NGF), nan-testeket/egyedoma testeket (sdAbs), enzimeket, stb.
Berendezések
Az iparág vezető AKTA Pure, AKTA Avant és Készítményes HPLC rendszereket használjuk különböző kromatográfiai módszerek elvégzésére, beleértve az affinitásos, ioncserés, hidrofób interakciós, fordított fázisú és méretkizáró kromatográfiát.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
