Значення деформаційної інженерії
Інженерія штаму має на меті зробити експресію-хазяїна з характеристиками очікувань, що необхідно для розробки біопрепаратів CMC і визначає якість і постійність продукту та виробничого процесу.
Ключові слова: генетична інженерія та скринінг штаму, конструкція білкового експресійного штаму, інженерія мікробної клітини, інженерія штаму бактерій, інженерія штаму дріжджів, конструкція прокаріотичних мікроорганізмів, інженерія еукаріотичних мікроорганізмів, сконструйований штам
Застосування: медицина для людини, медицина для тварин, вакцина, синтетична біологія, рекомбінантні високомолекулярні біопрепарати, біологічний реагент
Послуги розробки штамів Yaohai Bio-Pharma
Скориставшись більш ніж 10-річним досвідом CDMO в галузі мікробних біопрепаратів, ми накопичили багатий досвід у розробці та виборі різних типів плазмідних векторів і мікробних господарів (бактерій, дріжджів). Ми можемо знайти найкращу систему експресії для ваших унікальних біопрепаратів.
Ми зібрали різних мікробів-господарів із чіткими джерелами та стандартним CoA, у тому числі
Бактерії: Кишкова паличка (кишкова паличка)
Дріжджі: Піхія пастора (P. pastoris), сахароміцес церевізійний (S. cerevisiae), ручейник поліморфний (H. polymorpha)
Сервісні деталі
Послуги
|
Сервісні деталі
|
Мінімальна шкала часу/день
|
Очікувані результати
|
Інженерія штамів
|
Нокаут гена, або видалення гена
|
TBD
|
Звіт про інженерні деформації
|
Gene knock-in або Gene insertion
|
Конструкція штамів (E. палички)
|
Трансформація плазмід (багатохозяїни)
|
5
|
COA комерційних хостів,
Звіт про конструкцію деформації
|
ПЛР перевірка
|
Очищення штаму
|
Збереження штаму
|
Конструкція штамів (дріжджі)
|
Підготовка компетентних дріжджових клітин
|
10
|
Лінеаризація плазмід
|
Електроперетворення
|
Скринінг резистентності/дефіциту харчування
|
Очищення штаму
|
Збереження штаму
|
Скринінг відповідного господаря
|
Екстракція ДНК плазміди або геному
|
15-20
|
Процес перевірки хоста,
Звіт про тестування сконструйованих штамів
|
Перевірка методом ПЛР, розщеплення рестриктазою
|
Секвенування цільового гена
|
Скринінг хостів з високою експресією
|
Скринінг господарів з генетичною стабільністю
|
Збереження штаму
|
Вивчення проблеми
Сконструйована Hansenula polymorpha покращила продуктивність експресії VLP L1 HPV.
Ми встановили дріжджі Гансенула поліморфна (H. polymorpha) платформа для розробки та скринінгу експресії рекомбінантних білків/пептидів. По-перше, ми створили H. polymorpha штами з дефіцитом протеази шляхом цільової делеції гена. По-друге, вектор, що несе ген HPV L1, був трансформований у компетентний H. polymorpha клітина. Нарешті, ми відбираємо найкращий клон із сотень варіантів, який має генетичну стабільність і високопродуктивні властивості.
Наші сервісні особливості
Ми продемонстрували досвід роботи з різними мікробами-господарями, наприклад, Кишкова паличка (кишкова паличка) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Пічія пастора (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink штам 1/2/3/4; сахароміцети (S. cerevisiae) та Гансенула поліморфна (H. polymorpha).
Ми маємо досвід E. палички периплазматична секреція, експресія розчинних тілець і тілець включення, а також внутрішньоклітинна або секреційна експресія дріжджів.
Ми не додаємо антибіотики або додаємо антибіотики згідно з регуляторними вказівками.
Ми встановлюємо високопродуктивну скринінгову платформу для відбору високопродуктивних і стабільних штамів із понад ста штамів-кандидатів.
Ми гарантуємо, що процес інженерії штамів і скринінгу можна простежити за допомогою належного управління даними та записами.