Значення скрінінгу штамів
Скрінінг придатних хостів необхідний для розробки CMC біопродуктів, що визначає якість та узгодженість продукту та виробничого процесу. Пряма мета скрінінгу хостів полягає у забезпеченні кандидата на основну банку клітин (PCB) з високим рівнем експресії та високою стабільністю, як у термінах стабільності при передачі, так і у термінах зберігання. Скрінінг придатних хостів необхідний з двох головних причин:
- По-перше, вибрати мікробіальний хост з високим рівнем експресії. Існує декілька комерційно доступних штамів, які використовуються для експресії різних типів білків, таких як токсичні білки, розчинні білки або еукаріотичні білки.
- По-друге, екранувати господаря з генетичною стабільністю. Тестування генетичної стабільності є ключовою точкою протягом всього циклу виробництва. Пропонується вважати високу генетичну стабільність іншим ключовим характеристика для придатного штаму.
Ключові слова: вибір бактеріального штаму, екранування бактеріального штаму, високопродуктивне екранування бактерій або дріжджів, екранування високопродуктивних штамів, екранування стабільних штамів, екранування штамів з генетичною стабільністю Застосування: людська медицина, ветеринарна медицина, вакцини, синтетична біологія, рекомбінантні великі молекулярні біологічні препарати, біологічні реагенти
Послуги екранування штамів Yaohai Bio-Pharma
Завдяки більш як 10 рокам досвіду у сфері CDMO в біологічних продуктах на базі мікробів, ми підтримуємо розробку та виробництво різноманітних великих молекул, включаючи рекомбінантні підодинкові вакцини, вірусоподібні частинки (VLP), гормони (інсулін, GLP-1, гормон зросту), цитокіни (Інтерлейкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), фактори зросту (EGF, FGF, NGF), нанотіла/однодоменні антитіла (sdAbs), ензими тощо.
Ми накопали багатий досвід у виборі різних типів плазмідних векторів та мікробних хостів, включаючи бактерії Escherichia coli (E. coli), та дріжджами Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Ми можемо знайти найкращу систему експресії для вашого унікального біологічного продукту.
Ми зібрали різні мікробні хости з чіткими джерелами та стандартними свідоцтвами про аналіз (CoA), включаючи E.Coli бактеріальне вираження та вираження у дріжджях.
Деталі послуги
|
Послуги
|
Деталі послуги
|
Мінімальний термін/день
|
Результати виконання
|
|
Створення штаму (E. coli)
|
Трансформація плазміди (багато хостів)
|
5
|
Сертифікат аналізу комерційних хостів Звіт про створення штаму
|
|
Підтвердження PCR
|
|
Очищення штаму
|
|
Зберігання штаму
|
|
Створення штаму (дріжджі)
|
Підготовка компетентних клітин дріжджів
|
10
|
|
Лініаризація плазміди
|
|
Електротрансформація
|
|
Перевірка сопротивлення/дефіциту харчових речовин
|
|
Очищення штаму
|
|
Зберігання штаму
|
|
Скрінинг придатних господарів
|
Виділення ДНК плазміди або genomu
|
15-20
|
Процес скрінингу господаря COA інженерних штамів
|
|
ПЦР-верифікація, ділення обмежувальними ензимами
|
|
Секвенування цільового гена
|
|
Скрінинг господарів з високою експресією
|
|
Скрінинг господарів з генетичною стабільністю
|
|
Зберігання штаму
|
Вивчення випадку
Придатний господар підвищує рівень експресії білка у 2.5 рази.
Нам поручено розробити високопродуктивний E. coli штам. І ми спробували три типи комерційних E. coli носіїв, з урахуванням характеристик цільового білка. Показано, що штам С1-1 і С1-2 (Рис А: Лейк 1,2) підвищили рівень білка у 3,5 рази порівняно з початковим штамом клієнта (Рис А: Лейк 3).
Крім того, штам С1-1 проявив високу генетичну стабільність (Рис Б), і його було визнано кандидатом для створення первинного банку клітин (ПБК).
Особливості нашого сервісу
Доведена експертиза в роботі з різними мікробними носіями, наприклад, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae і H. polymorpha .
Ми маємо досвід роботи з E. coli периплазматичним секреційним виробництвом, солюбільним і виробництвом тіл увключень, а також інтрacellular або секреційним виробництвом дріжджів. Ми не додаємо антибіотики або додаємо їх під регуляторним керуванням.
Ми створили платформу для високопродуктивного екранування, щоб вибирати штампи з високою продуктивністю та стабільність серед більш ніж сотні кандидатських штампів.
Забезпечується, щоб процес інженерії та екранування штампів був відстежуваним, за принципами Добрих Правил Керування Данними та Записами.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
