Значення скринінгу штамів
Скринінг відповідних господарів необхідний для розробки біопрепаратів CMC, що визначає якість і постійність продукту та виробничого процесу. Безпосередня мета скринінгу хазяїна полягає в тому, щоб забезпечити потенційний первинний клітинний банк (PCB) з високим рівнем експресії та високою стабільністю як щодо стабільності пасажу, так і стабільності при зберіганні. Скринінг відповідного господаря необхідний з двох основних причин:
- По-перше, вибрати мікробного господаря з високим рівнем експресії. Існує кілька комерційно доступних штамів, які використовуються для експресії різних типів білків, таких як токсичні білки, розчинні білки або еукаріотичні білки.
- По-друге, перевірити господаря з генетичною стабільністю. Тестування на генетичну стабільність є ключовим моментом протягом життєвого циклу виробництва. Припускається, що висока генетична стабільність визнається ще однією ключовою характеристикою відповідного штаму.
Ключові слова: селекція мікробного штаму, скринінг мікробного штаму, високопродуктивний скринінг бактерій або дріжджів, скринінг високопродуктивного штаму, скринінг високостабільного штаму, скринінг генетично стабільного штаму Застосування: медицина людини, медицина тварин, вакцина, синтетична біологія, рекомбінантна велика молекула біопрепарати, біологічний реактив
Послуги скринінгу штамів Yaohai Bio-Pharma
Завдяки більш ніж 10-річному досвіду CDMO у мікробних біопрепаратах ми підтримуємо розробку та виробництво різних великих молекул, включаючи рекомбінантні субодиничні вакцини, вірусоподібні частинки (VLP), гормони (інсулін, GLP-1, гормон росту), цитокіни ( Інтерлейкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), фактори росту (EGF, FGF, NGF), нанотіла/однодоменні антитіла (sdAbs), ферменти тощо.
Ми накопичили багатий досвід у виборі різних типів плазмідних векторів і мікробних господарів, включаючи бактерії Кишкова паличка (E. coli), і дріжджі Піхія пастора (P. pastoris), цукровий гриб (S. cerevisiae), гансенула поліморфна (H. polymorpha). Ми можемо знайти найкращу систему експресії для ваших унікальних біопрепаратів.
Ми зібрали різних мікробів-господарів із чіткими джерелами та стандартним CoA, у тому числі E.coli віджим і віджим дріжджів.
Сервісні деталі
|
Сервіс
|
Сервісні деталі
|
Мінімальна шкала часу/день
|
Очікувані результати
|
|
Конструкція штаму (E. coli)
|
Трансформація плазмід (багатохозяїни)
|
5
|
Сертифікат автентичності комерційних хостів Звіт про конструкцію штаму
|
|
ПЛР перевірка
|
|
Очищення штаму
|
|
Збереження штаму
|
|
Конструкція штамів (дріжджі)
|
Підготовка компетентних дріжджових клітин
|
10
|
|
Лінеаризація плазмід
|
|
Електроперетворення
|
|
Скринінг резистентності/дефіциту харчування
|
|
Очищення штаму
|
|
Збереження штаму
|
|
Скринінг відповідного господаря
|
Екстракція ДНК плазміди або геному
|
15-20
|
Процес скринінгу COA сконструйованих штамів
|
|
Перевірка методом ПЛР, розщеплення рестриктазою
|
|
Секвенування цільового гена
|
|
Скринінг хостів з високою експресією
|
|
Скринінг господарів з генетичною стабільністю
|
|
Збереження штаму
|
Вивчення проблеми
Відповідний господар підвищує рівень експресії білка в 2.5 рази.
Нам доручено розвивати високопродуктивні E. палички процідити. І ми спробували три види реклами E. палички господарів, на основі характеристик цільового білка. Показано, що штами S1-1 і S1-2 (рис. A: доріжка 1,2, 3.5) підвищили рівень білка в 3 рази, ніж вихідний штам клієнта (рис. A: доріжка XNUMX).
Крім того, штам S1-1 продемонстрував високу генетичну стабільність (рис. B), і він був визнаний штамом-кандидатом для первинного банку клітин (PCB).
Наші сервісні особливості
Продемонстрований досвід роботи з різними мікробними господарями, наприклад, E. палички DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink штам 1/2/3/4; S.cerevisiae та H. polymorpha.
Ми маємо досвід E. палички периплазматична секреція, експресія розчинних тілець і тілець включення, а також внутрішньоклітинна або секреційна експресія дріжджів. Ми не додаємо антибіотики або додаємо антибіотики згідно з регуляторними вказівками.
Ми встановлюємо високопродуктивну скринінгову платформу для відбору високопродуктивних і стабільних штамів із понад ста штамів-кандидатів.
Гарантується, що процес інженерії штамів і скринінгу можна простежити відповідно до належного управління даними та записами.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
