การผลิตโปรตีน рекомbinant: สายพันธุ์ E. coli ที่ถูกออกแบบใหม่

Escherichia coli (E. coli) มีบทบาทสำคัญในกระบวนการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในอุตสาหกรรมชีวเภสัชภัณฑ์ โดยเป็นเวกเตอร์การแสดงออกตัวแรกสำหรับการผลิตยาชีวภาพ E. coli มีข้อได้เปรียบหลายประการ เช่น การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว การควบคุมทางพันธุกรรมที่สะดวก และการสังเคราะห์โปรตีนรีคอมบิแนนท์อย่างรวดเร็ว การปรับแต่งอย่างกว้างขวางทำให้ E. coli เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมสำหรับการแสดงออกของโปรตีน นำไปสู่การออกแบบสายพันธุ์ E. coli ที่ถูกดัดแปลงทางวิศวกรรมหลากหลายชนิด

Yaohai Bio-Pharma เชี่ยวชาญในการให้บริการแบบครบวงจรสำหรับกระบวนการหมัก การกรอง การพัฒนาสูตร และการผลิตชุดยาชีวภาพโดยใช้ระบบการแสดงออกของ E. coli จากประสบการณ์อันลึกซึ้งของ Yaohai เราสรุปได้ว่ามีสายพันธุ์ E. coli ทั่วไปสี่สายพันธุ์ที่ใช้สำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์และคุณลักษณะของพวกมัน

สายพันธุ์ BL 21

ได้มาจากการสืบเชื้อสาย E. coli B BL21 สายพันธุ์ขาดเอนไซม์โปรตีเอส Lon และ OmpT ซึ่งเป็นเอนไซม์โปรตีเอสในเยื่อหุ้มเซลล์ด้านนอก เอนไซม์ Lon ส่วนใหญ่ทำลายโปรตีนจากภายนอก ในขณะที่ OmpT ส่วนใหญ่ทำลายโปรตีนในเมทริกซ์นอกเซลล์ การขาดเอนไซม์โปรตีเอสทั้งสองชนิดนี้สามารถป้องกันการเสื่อมสภาพของโปรตีน рекомบิแนนท์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

สายพันธุ์ Origami

สายพันธุ์ Origami เป็นอนุพันธ์ของ E. coli K-12 มีการกลายพันธุ์ในไทโอเรโดซินรีดักเทสและกลูตาไธโอนรีดักเทส ซึ่งช่วยส่งเสริมการก่อตัวของโปรตีนที่พับตัวอย่างถูกต้องที่มีพันธะซัลเฟอร์ในตัวเองและเพิ่มความละลายน้ำของโปรตีน สายพันธุ์ Origami รวมถึง Origami, Origami 2 และ Origami B เหมาะสำหรับการแสดงออกของโปรตีนที่มีกิจกรรมและมีพันธะซัลเฟอร์

สายพันธุ์ SHuffle

SHuffle เป็นเชื้อพันธุ์ที่แสดงออกอย่างต่อเนื่องสำหรับเอนไซม์ disulfide bond isomerase DsbC ในไซโทพลาสซึม ช่วยส่งเสริมการสร้างพันธะดิสวัลไฟด์ที่ถูกต้องในโปรตีนที่ถูกออกซิไดซ์ นอกจากนี้ยังทำหน้าที่เป็นโปรตีนช่วยพับสำหรับการพับตัวของโปรตีน ช่วยให้เกิดรูปแบบโครงสร้างที่ถูกต้อง

เชื้อพันธุ์ Rosetta

เชื้อพันธุ์ Rosetta เพิ่มเติม tRNAs ที่สอดคล้องกับโคดอนหายากใน E. coli โดยมีจุดประสงค์เพื่อเพิ่มระดับการแสดงออกของยีนต่างถิ่น โดยเฉพาะยีนจากสิ่งมีชีวิตเซลล์แกน ภายในระบบโปรคาริโอติก ซึ่งพัฒนามาจาก BL21 และบรรทุกพลาสมิด pRARE ที่ต้านคลอรามเฟนิคอล ซึ่งเสริม tRNAs หกชนิดที่สอดคล้องกับโคดอนหายาก (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, และ GGA) ที่ไม่มีอยู่เดิมใน E. coli เพื่อให้มีการ expresses โปรตีนที่ "ครอบคลุม" มากขึ้น

สรุป

ปัจจัยหลักสามประการสำหรับการผลิตโปรตีน рекомbinant ที่ประสบความสำเร็จคือโฮสต์ เวกเตอร์ และเงื่อนไขของการเพาะเลี้ยง โดยอาศัยความเข้าใจในคุณสมบัติทางกายภาพเคมีของโปรตีน рекомbinant การได้เปรียบเฉพาะของแต่ละสายพันธุ์ และความต้องการเฉพาะของงานทดลอง ควรเลือกโฮสต์ที่เหมาะสมที่สุด นอกจากนี้ ควรปรับปรุงปัจจัยต่างๆ เช่น เวกเตอร์พลาสมิด อุณหภูมิ และตัวกระตุ้น เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการแสดงออกของโปรตีน

Yaohai Bio-Pharma กำลังมองหามาตรฐานหรือพันธมิตรรายบุคคลทั่วโลกอย่างแข็งขัน และเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากท่านมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเราได้ทุกเวลา: [email protected]