หมวดหมู่ทั้งหมด
บทความ

สำรวจโลกที่น่าสนใจของกระบวนการตกตะกอนลิเทียมคลอไรด์

Oct 28, 2024

การตกตะกอนด้วยคลอไรด์ของลิเธียมถูกใช้อย่างแพร่หลายในการแยก RNA จากสารละลาย

นี่คือขั้นตอนของการดำเนินการ:

1. การเตรียมตัวอย่าง: เริ่มต้นด้วยตัวอย่างที่มี RNA เช่น ในหลอดทดลอง สารผสมสำหรับการถอดลอก mRNA

2. การเติมคลอไรด์ของลิเธียม: เพิ่มปริมาตรที่เหมาะสมของสารละลายคลอไรด์ของลิเธียมเข้มข้นลงในสารละลาย RNA

3. การบ่ม: หลังจากเติมคลอไรด์ของลิเธียมแล้ว สารละลายนี้จะถูกบ่มที่อุณหภูมิต่ำ โดยทั่วไปประมาณ -20°C สิ่งนี้ทำให้โมเลกุล RNA ตกตะกอนออกจากสารละลาย

4. การหมุนเหวี่ยง: หลังจากการบ่มแล้ว สารละลายจะถูกหมุนเหวี่ยงด้วยความเร็วรอบสูง ซึ่งจะแยก RNA ที่ตกตะกอนออกจากส่วนที่เหลือของสารละลายซึ่งมีสิ่งปนเปื้อน

5. การล้าง: เมื่อเสร็จสิ้นการหมุนเหวี่ยงแล้ว ให้ระมัดระวังในการกำจัดสารน้ำบนชั้นเหนือ (supernatant) โดยไม่รบกวนการตกตะกอนของ RNA ล้างอนุภาค RNA ด้วยเอทานอลเย็นหรือไอโซโพรพิลแอลกอฮอล์เพื่อกำจัดสิ่งปนเปื้อนที่เหลืออยู่

6. การละลาย RNA: หลังจากการล้าง RNA จะถูกทำให้แห้งด้วยอากาศชั่วคราว จากนั้นจะถูกละลายใหม่ในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม เช่น TE buffer (Tris-EDTA buffer) หรือน้ำกลั่น การใช้เข็มดูดอย่างเบามือหรือกระแสกวนอาจจำเป็นเพื่อให้ RNA ละลายได้อย่างเพียงพอ

7. การวัดปริมาณและการวิเคราะห์: สุดท้าย RNA ที่แยกได้จะถูกวัดปริมาณโดยการสเปกโตรโฟโตเมตรีรังสีอัลตราไวโอเลตหรือวิธีการเรืองแสง ซึ่งจะช่วยกำหนดความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของตัวอย่าง RNA ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการนำไปใช้งานในกระบวนการถัดไป เช่น การห่อหุ้ม LNP และการ transfect เซลล์

Yaohai Bio-Pharma มีความชำนาญในการใช้วิธีการตกตะกอนด้วยลิเทียมคลอไรด์ในกระบวนการผลิต เนื่องจากวิธีนี้มีขั้นตอนง่าย ต้นทุนต่ำ และสามารถผลิต RNA คุณภาพสูงที่เหมาะสมสำหรับการใช้งานทางชีวโมเลกุลหลายประเภท อย่างไรก็ตาม การปรับแต่งเงื่อนไข (เช่น ความเข้มข้นของลิเทียมคลอไรด์ เวลาการเพาะเลี้ยง และความเร็วของการหมุนเหวี่ยง) เป็นสิ่งสำคัญเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดสำหรับตัวอย่างเฉพาะ

พึ่งพาแพลตฟอร์ม RNASci ที่ทรงพลังและเป็นของตนเองของเรา เรายังให้บริการสังเคราะห์ RNA แบบเฉพาะเจาะจง และผลิตภัณฑ์ในแคตาล็อก mRNA (สูงสุด 10 kb), circRNA (สูงสุด 4 kb) และ LNP อีกด้วย เราได้สร้างเทคโนโลยีการสังเคราะห์ mRNA/circRNA อย่างครบวงจรเพื่อให้ได้ RNA คุณภาพสูง เช่น การออกแบบและการปรับแต่งลำดับ, IVT, การทำให้เป็นวงกลม, การกรอง และการห่อหุ้มด้วย LNP ทั้งหมดผลิตภัณฑ์ผ่านมาตรฐานการควบคุมคุณภาพที่เข้มงวด

ยาโอไฮ ไบโอ-ฟาร์มา เป็นบริษัท CRDMO ชีวภาพแห่งแรกและใหญ่ที่สุดที่เน้นระบบการแสดงออกของจุลินทรีย์ในภูมิภาคเกรอเตอร์ไชน่า เราให้บริการแบบครบวงจรหรือบริการเฉพาะด้าน เช่น การสังเคราะห์ RNA, การวิศวกรรมและการสร้างเชื้อพันธุ์, การพัฒนากระบวนการทางท้ายน้ำและต้นน้ำ, การผลิตสารยาตามมาตรฐาน GMP หรือไม่ใช่ GMP และบริการบรรจุขวดสำหรับรูปแบบต่าง ๆ เช่น mRNA, circRNA, พลาสมิด RNA, โปรตีน рекомбинันต์, เพปไทด์, เอนไซม์, แอนติบอดีโดเมนเดียว (sdAbs) และ VLPs เราพร้อมตอบสนองความต้องการทางคลินิกและการพาณิชย์ของลูกค้าทั่วโลกในด้านยาชีวภาพ วัคซีน และการตรวจวินิจฉัย ทั้งสำหรับมนุษย์และสัตวแพทย์

ยาโอไฮ ไบโอ-ฟาร์มา ยังคงมองหาพันธมิตรสถาบันหรือบุคคลทั่วโลกอย่างแข็งขันและเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเรา: [email protected]