หมวดหมู่ทั้งหมด
บทความ

พลาสไมด์: เศษโมเลกุล DNA วงกลมขนาดเล็กที่มีศักยภาพมหาศาล

Feb 14, 2025

พลาสมิด โมเลกุล DNA วงกลมขนาดเล็ก มีบทบาทสำคัญในฐานะเวกเตอร์สำหรับการรีคอมไบน์ DNA ในงานวิจัยชีววิทยาเชิงโมเลกุลและการบำบัดด้วยยีน การผลิตและความบริสุทธิ์ของพลาสมิดเป็นสิ่งสำคัญ โดยที่สัดส่วนของ supercoiled และปริมาณเอนโดท็อกซินเป็นสองปัจจัยหลักที่มีผลต่อคุณภาพของพลาสมิด

ชนิดย่อยของพลาสมิด

พลาสมิดที่สกัดจาก Escherichia coli (E. coli) มีอยู่ในหลายชนิดย่อย: แบบ supercoiled (SC), แบบวงกลมเปิด (OC) และแบบเส้นตรง (L) (รูปที่ 1) โดยเฉพาะพลาสมิดแบบ supercoiled มีความเสถียร เอเจนติกิตี้สูง และประสิทธิภาพในการ transfected และการแสดงออกสูง

屏幕截图 2025-01-15 165248.png

รูปที่ 1. แผนภาพแสดงชนิดย่อยของพลาสมิดทั่วไป

ในการแยกพลาสมิด DNA ด้วยอิเล็กโทรโฟรซิสบนเจลอะแกโรส อัตราเร็วของการเคลื่อนที่จะเป็น supercoiled DNA, linear DNA และ open circular DNA (รูปที่ 2)

屏幕截图 2025-01-15 165400.png

รูปที่ 2. ลักษณะการเคลื่อนที่จากการแยกพลาสมิดชนิดต่าง ๆ ด้วยอิเล็กโทรโฟรซิสบนเจลอะแกโรส

บริษัทยาหǎย ไบโอ-ฟาร์มาได้พัฒนากระบวนการและเทคนิคของตนอย่างต่อเนื่อง เพื่อให้มั่นใจว่าสัดส่วนของพลาสมิดระดับการถ่ายโอนมีความเป็นซูเปอร์คอยล์ ≥85% และพลาสมิดระดับการวิจัยมีความเป็นซูเปอร์คอยล์ ≥50% ต่อไปนี้เป็นตัวอย่างการสาธิต (รูปที่ 3) โดยใช้วิธีการแยกสารพันธุกรรมบนเจลอะแกโรส ร่วมกับซอฟต์แวร์ Gel-Pro Analyzer เพื่อตรวจวัดสัดส่วนของซูเปอร์คอยล์

屏幕截图 2025-01-15 165820.png

รูปที่ 3. ผลการตรวจสอบคุณภาพสัดส่วนพลาสมิดซูเปอร์คอยล์

เอนโดท็อกซิน

เอนโดท็อกซิน เป็นองค์ประกอบของผนังเซลล์แบคทีเรียชนิดกรัมลบ มีองค์ประกอบหลักคือลิโพโพลีแซคคาไรด์เอ (LPS-A) ซึ่งเป็นองค์ประกอบที่ทำให้เกิดพิษ ในระหว่างกระบวนการสกัดพลาสมิด เอนโดท็อกซินจะถูกปล่อยออกมาในสารละลายไลซิส ส่งผลกระทบอย่างรุนแรงต่อประสิทธิภาพของการถ่ายโอนพลาสมิดเข้าสู่เซลล์ นอกจากนี้ยังสามารถกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบไม่จำเพาะในเซลล์ ทำให้เกิดผลบวกเท็จในงานทดลอง

Yaohai Bio-Pharma ใช้วิธีการ "ไม่นำเข้า" และ "กำจัดสูง" โดยควบคุมอย่างเข้มงวดการใช้สารละลายและวัสดุที่มีเอนโดท็อกซินตลอดกระบวนการฟอก นอกจากนี้บริษัทยังได้พัฒนาวิธีการกำจัดเอนโดท็อกซินที่มีประสิทธิภาพ โดยเสนอระดับของปริมาณเอนโดท็อกซินสามระดับ: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, และ ≤0.005 EU/µg

Yaohai Bio-Pharma มีสายบริการสกัดพลาสมิดความผ่านสูง สามารถส่งมอบพลาสมิดที่สกัดได้ 1 มิลลิกรัมในเวลาเพียงหนึ่งสัปดาห์ โดยค่าเริ่มต้นให้การทดสอบคุณภาพ (QC) กว่าเจ็ดข้อ เพื่อให้มั่นใจในการส่งมอบพลาสมิดที่มีคุณภาพสูงและมาตรฐานสูงจากหลายมุมมอง

เราได้ดำเนินการค้นหาพันธมิตรระดับโลกทั้งหน่วยงานหรือบุคคลทั่วไปอย่างแข็งขัน เราเสนอค่าตอบแทนที่แข่งขันได้มากที่สุดในอุตสาหกรรม หากคุณมีคำถามใด ๆ กรุณาติดต่อเราได้โดยตรง: [email protected]