Плазмида: Маленькая круглая молекула ДНК с большим потенциалом

Плазмиды, маленькие круговые молекулы ДНК, служат важными векторами для рекомбинации ДНК в исследовании молекулярной биологии и генной терапии. Урожайность и качество плазмид имеют решающее значение, причем пропорция суперспиралей и содержание эндотоксинов являются двумя важными факторами, влияющими на качество плазмид.

Подтипы плазмид

Плазмиды, извлеченные из Escherichia coli (E. coli), существуют в различных подтипах: суперспиральные (SC), открытые циркуляры (OC) и линейные формы (L) (Рисунок 1). Среди них суперспиральные плазмиды демонстрируют отличную стабильность, антигенность и высокую эффективность трансфекции и экспрессии.

Рисунок 1. Схематическая диаграмма распространенных подтипов плазмид

При электрофорезе плазмидной ДНК в агарозном геле порядок скорости миграции следующий: суперспиральная ДНК, линейная ДНК и открытая циркулярная ДНК (Рисунок 2).

Рисунок 2. Шаблон миграции при электрофорезе в агарозном геле разных подтипов плазмид

Yaohai Bio-Pharma постоянно совершенствует свои процессы и технологии, чтобы гарантировать, что доля суперспиралей в плазмидах трансфекционного класса составляет ≥85%, а в исследовательских плазмидах — ≥50%. Ниже приведен пример демонстрации (Рисунок 3), где электрофорез в агарозном геле сочетается с программным обеспечением Gel-Pro Analyzer для определения доли суперспиралей.

Рисунок 3. Результаты проверки качества доли суперспиралей в плазмидах

Эндотоксин

Эндотоксин, компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий, в основном состоит из липополисахарида A (LPS-A) как своего токсичного компонента. Во время экстракции плазмид эндотоксин выделяется в раствор лизиса, значительно влияя на эффективность трансфекции плазмид в клетки. Кроме того, он может активировать неспецифические иммунные реакции клеток, что приводит к ложноположительным результатам в экспериментах.

Yaohai Bio-Pharma применяет подход "неналожения" и "высокого удаления", строго контролируя использование реактивов и материалов, содержащих эндотоксин, на всех этапах процесса очистки. Компания также разработала эффективный метод удаления эндотоксина, предлагая три уровня содержания эндотоксина: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg и ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma располагает высокоэффективной линией услуг по извлечению плазмид, способной предоставлять 1 мг извлеченных плазмид всего за неделю. По умолчанию проводится более семи тестов контроля качества (QC), чтобы обеспечить доставку высококачественных плазмид, соответствующих высоким стандартам с различных точек зрения.

Мы также активно ищем глобальных партнеров среди организаций или частных лиц. Мы предлагаем самое конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]