Плазмида: небольшая кольцевая молекула ДНК с большим потенциалом

Плазмиды, небольшие кольцевые молекулы ДНК, служат важными векторами для рекомбинации ДНК в молекулярно-биологических исследованиях и генной терапии. Выход и качество плазмид имеют решающее значение, причем двумя важными факторами, влияющими на качество плазмид, являются суперспиральная пропорция и содержание эндотоксинов.

Подтипы плазмид

Плазмиды, выделенные из Escherichia coli (E. coli), существуют в различных подтипах: суперспиральные (SC), открытые кольцевые (OC) и линейные (L) формы (рисунок 1). Среди них суперспиральные плазмиды демонстрируют превосходную стабильность, антигенность и высокую эффективность трансфекции и экспрессии.

Рисунок 1. Схематическая диаграмма распространенных подтипов плазмид

При электрофорезе плазмидной ДНК в агарозном геле порядок скорости миграции следующий: сверхспиральная ДНК, линейная ДНК и открытая кольцевая ДНК (рисунок 2).

Рисунок 2. Паттерн миграции различных подтипов плазмид при электрофорезе в агарозном геле

Yaohai Bio-Pharma постоянно совершенствует свои процессы и методы, чтобы гарантировать, что доля суперспирализации плазмид трансфекционного класса составляет ≥85%, а доля плазмид исследовательского класса составляет ≥50%. Ниже приведен пример (рисунок 3), где электрофорез в агарозном геле сочетается с программным обеспечением Gel-Pro Analyzer для определения доли суперспирализации.

Рисунок 3. Результаты проверки качества плазмидной суперспиральной пропорции

эндотоксин

Эндотоксин, компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий, в основном состоит из липополисахарида А (ЛПС-А) в качестве своего токсического компонента. Во время извлечения плазмиды эндотоксин высвобождается в лизирующий раствор, что серьезно влияет на эффективность трансфекции плазмиды в клетки. Кроме того, он может активировать неспецифические иммунные реакции в клетках, что приводит к ложноположительным результатам в экспериментах.

Yaohai Bio-Pharma применяет подход «невведения» и «высокого удаления», строго контролируя использование реагентов и материалов, содержащих эндотоксин, на протяжении всего процесса очистки. Компания также разработала эффективный метод удаления эндотоксинов, предлагая три уровня содержания эндотоксинов: ≤0.1 EU/мкг, ≤0.01 EU/мкг и ≤0.005 EU/мкг.

Yaohai Bio-Pharma располагает высокопроизводительной линией по извлечению плазмид, способной доставлять 1 мг извлеченных плазмид всего за одну неделю. По умолчанию она обеспечивает более семи тестов контроля качества (QC), чтобы гарантировать доставку высококачественных, высокостандартных плазмид с разных точек зрения.

Мы также активно ищем институциональных или индивидуальных глобальных партнеров. Мы предлагаем самую конкурентоспособную компенсацию в отрасли. Если у вас есть какие-либо вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами: [email protected]