Миникольцевая ДНК: открывая будущее генной терапии

Генная терапия, как передовой терапевтический подход, приносит новую надежду для многочисленных неизлечимых заболеваний. Среди них миникольцевая ДНК (мкДНК), служащая невирусным носителем ДНК, постепенно демонстрирует свое уникальное очарование.

Введение в мкДНК

mcDNA происходит из плазмидной ДНК (pDNA) путем удаления прокариотических последовательностей и сохранения только эукариотических последовательностей, образуя меньший и более безопасный вектор доставки генов. По сравнению с pDNA, mcDNA значительно снижает иммуногенность, избегает риска переноса генов устойчивости к антибиотикам и достигает более эффективной экспрессии генов в клетках, повышая эффективность лечения.

Yaohai Bio-Pharma создала платформы производства, соответствующие требованиям GMP, как для кольцевых, так и для линейных плазмид, подкрепленные зрелой разработкой процесса и опытом производства GMP. Yaohai может удовлетворить различные потребности клиентов, начиная от доклинических исследований, подачи IND и клинических испытаний до коммерческого производства, и эффективно продвигать ход проектов.

Процесс производства мкДНК

Производство мкДНК включает такие этапы, как амплификация родительской плазмиды (PP), индукция рекомбинации и удаление примесей. В настоящее время для производства мкДНК используются различные системы рекомбиназы, включая интегразу фага λ, рекомбиназу фага P1 Cre, резолвазу ParA и систему самонаводящейся эндонуклеазы PhiC31-integrase/I-SceI. Однако каждая система сталкивается с проблемами с точки зрения выхода, чистоты и стоимости. Чтобы увеличить выход, исследователи изучают такие стратегии, как модификация штаммов генов и оптимизация условий ферментации.

Очистка мкДНК

Методы очистки мкДНК эволюционировали от модификации остова до новых хроматографических методов. Несмотря на различные стратегии очистки, остаются такие проблемы, как низкие показатели восстановления и высокие затраты. Недавние исследования достигли эффективной очистки мкДНК с использованием таких методов, как модифицированные кадаверином монолитные колонки, но все еще необходимы дальнейшее снижение затрат и улучшение показателей восстановления.

Количественный анализ мкДНК

В настоящее время количественный анализ мкДНК в основном опирается на такие методы, как qPCR и электрофорез, которые имеют проблемы с высокой стоимостью и ограниченной точностью. В последних исследованиях использовалась технология хроматографии для достижения быстрого и точного количественного анализа мкДНК, что обеспечивает новые средства для контроля качества мкДНК.

Перспективы и проблемы применения мкДНК

mcDNA демонстрирует широкие перспективы применения в генной терапии, ДНК-вакцинах и клеточной терапии. Однако такие проблемы, как низкий выход, высокая стоимость, сложный контроль качества и ограниченная эффективность доставки in vivo, все еще требуют решения. В будущем исследователи сосредоточатся на увеличении выхода mcDNA, снижении затрат, оптимизации методов контроля качества и разработке более эффективных систем доставки для содействия развитию mcDNA в клинических приложениях.

Заключение

Как новый невирусный носитель ДНК, мкДНК имеет большой потенциал в генной терапии и смежных областях. Несмотря на множество проблем, с развитием исследований и технологий ожидается, что мкДНК станет самым популярным невирусным носителем ДНК в будущем, что принесет прорывы в медицинскую сферу.

Yaohai Bio-Pharma также активно ищет институциональных или индивидуальных глобальных партнеров и предлагает самую конкурентоспособную компенсацию в отрасли. Если у вас есть вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами: [email protected]