Производство моноклональных антител в E. coli: Достижения и перспективы

Моно克лональные антитела (mAbs), которые являются растворимыми гликопротеинами примерно 150 кДа, состоящими из тяжелых и легких цепей, широко используются в лечении рака и autoimmune болезней. В последние годы методы производства mAbs и их производных стали разнообразными, с Escherichia coli ( E. coli ) как важным хозяином для производства фрагментов антител.

В производстве mAbs Yaohai Bio-Pharma выделяется богатым опытом в области исследований и разработок. Благодаря matures платформе, передовому оборудованию и инновационной технологии полного экологического выражения, Yaohai предлагает комплексные услуги от создания клеточной библиотеки до fill&finish, полностью настраивая mAbs для клиентов.

Методы производства mAbs в E. coli

E. coli обеспечивает быстрый рост, низкие затраты, простоту в эксплуатации и гибкость в выражении внутри цитоплазмы, периплазма или культуральной среды. В E. coli производство антител главным образом делится на периплазматическое, цитоплазматическое и полуокисленное цитоплазматическое производство, а также системы синтеза белков вне клетки (CFPS). Периплазматическое производство достигло высокой выходной продукции функционального полноразмерного иммуноглобулина G (FL-IgG) благодаря оптимизации баланса между выражением и секрецией. Цитоплазматическое производство сталкивается с проблемами из-за восстанавливающей среды, но функциональный FL-IgG был успешно выражен путем инженерной модификации штаммов для создания окислительной среды. Система CFPS достигла эффективного производства антител за счет регулирования областей инициации трансляции и добавления хелперных белков.

Характеристика антител и контроль качества

Контроль качества антител включает биохимические, биофизические и биологические характеристики. Биохимическая характеристика анализирует структуру антител, последовательность и гликозилирование, среди прочего. Биофизическая характеристика оценивает однородность, растворимость и устойчивость. Биологическая характеристика подтверждает биоактивность антител, включая АДЦК и КДЦК, среди прочего. Хотя дегликозилированные антитела, произведенные в E. coli, лишены некоторых функций Fc-эффектора, исследования показали, что их устойчивость схожа с устойчивостью гликозилированных антител, и они демонстрируют схожую терапевтическую эффективность при испытанных условиях.

Для восстановления или усиления иммунных эффектов дегликозилированных антител могут быть инженерно модифицированы области Fc. Например, можно отобрать мутанты, связывающиеся с FcɣRI, для усиления функции АДЦК-эффектора. Эти модифицированные антитела демонстрируют значительные биологические эффекты и терапевтический потенциал как in vitro, так и in vivo.

Заключение

Подводя итог, производство дегликозилированных антител в E. coli сделало важный прогресс в области производства антител, снизив затраты и улучшив качество. Несмотря на отсутствие некоторых функций Fc-эффектора, через инженерное проектирование они демонстрируют усиленные функции эффектора и терапевтический потенциал. Ожидается, что больше дегликозилированных антител, произведённых в E. coli, войдут в клинические исследования в будущем.

Мы также активно ищем глобальных партнеров, как учреждений, так и частных лиц. Мы предлагаем самое конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам по [email protected]