Производство моноклональных антител в E. coli: достижения и перспективы

Моноклональные антитела (mAbs), которые представляют собой растворимые гликопротеины массой около 150 кДа, состоящие из тяжелых и легких цепей, широко используются в лечении рака и аутоиммунных заболеваний. В последние годы методы производства mAbs и их производных стали разнообразными, с Escherichia coli (E. палочки) становится важным хозяином для производства фрагментов антител.

В производстве mAbs Yaohai Bio-Pharma выделяется богатым опытом в области НИОКР. Благодаря зрелой платформе, передовому оборудованию и инновационной технологии полностью экологичной экспрессии Yaohai предлагает комплексные услуги от создания банка клеток до заполнения и завершения, полностью настраивая mAbs для клиентов.

Методы получения моноклональных антител в E. coli

E. coli предлагает быстрый рост, низкие затраты, простоту эксплуатации и гибкость в экспрессии в цитоплазме, периплазме или культуральной среде. В E. coli производство антител в основном подразделяется на периплазматическое, цитоплазматическое и полуокисленное цитоплазматическое производство, а также системы бесклеточного синтеза белка (CFPS). Периплазматическое производство достигло высоких выходов функционального полноразмерного иммуноглобулина G (FL-IgG) за счет оптимизированного баланса экспрессии и секреции. Цитоплазматическое производство сталкивается с трудностями из-за восстановительной среды, но функциональный FL-IgG был успешно экспрессирован инженерными штаммами для создания окислительной среды. Система CFPS достигла эффективного производства антител за счет корректировки областей инициации трансляции и добавления белков-шаперонов.

Характеристика антител и контроль качества

Контроль качества антител включает биохимическую, биофизическую и биологическую характеристику. Биохимическая характеристика анализирует структуру антитела, последовательность и гликозилирование, среди прочего. Биофизическая характеристика оценивает однородность, растворимость и стабильность. Биологическая характеристика подтверждает биологическую активность антител, включая ADCC и CDC, среди прочего. Хотя дегликозилированные антитела, вырабатываемые в E. coli, не имеют определенных эффекторных функций Fc, исследования показали, что их стабильность аналогична стабильности гликозилированных антител, и они проявляют аналогичную терапевтическую эффективность в тестируемых условиях.

Для восстановления или усиления иммунных эффектов дегликозилированных антител можно сконструировать Fc-домены. Например, мутанты, связывающиеся с FcɣRI, можно скринировать для усиления эффекторной функции ADCC. Эти сконструированные антитела демонстрируют значительные биологические эффекты и терапевтический потенциал как in vitro, так и in vivo.

Заключение

Подводя итог, можно сказать, что производство дегликозилированных антител в E. coli достигло важного прогресса в области производства антител, снизив затраты и улучшив качество. Хотя им не хватает некоторых эффекторных функций Fc, благодаря инженерному дизайну они демонстрируют улучшенные эффекторные функции и терапевтический потенциал. Ожидается, что больше дегликозилированных антител, произведенных в E. coli, войдут в клинические исследования в будущем.

Мы также активно ищем институциональных или индивидуальных глобальных партнеров. Мы предлагаем самую конкурентоспособную компенсацию в отрасли. Если у вас есть какие-либо вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами по адресу [email protected]