мРНК синтезируется путем транскрипции in vitro (IVT) из линеаризованной плазмидной ДНК (пДНК). Некоторые побочные продукты также образуются во время процедуры IVT, в том числе двухцепочечная РНК (дцРНК), идентифицированная как основные триггеры врожденного иммунного пути. Крайне важно удалить примеси и получить высокие выходы чистая мРНК для исследований мРНК in vitro/vivo и терапевтических применений.
Компания Yaohai Bio-Pharma разработала ряд технологий синтеза мРНК, обеспечивающих очень чистая мРНК, такие как разработка и оптимизация последовательностей, IVT, очистка, лиофилизация и инкапсуляция липидных наночастиц (LNP). Вся продукция выпускается под строгими стандартами контроля качества. Аффинная хроматография (АС), основанная на сильном и селективном взаимодействии между 3'-концом полиА мРНК и олиго-dT в стационарной фазе, является эффективной и масштабируемой стратегией очистки мРНК.
Результат
| Продукт |
Индивидуальная особо чистая мРНК
|
| Длина |
100~10,000 XNUMX нуклеотидов |
| Содержание РНК |
100 мкг~10 мг (OD260) |
| чистота |
A260 / A280 |
| Идентификация и чистота |
Электрофорез в агарозном геле (AGE)
Капиллярный электрофорез (КЭ)
|
| Buffer |
Вода, не содержащая РНКазы (жидкость) |
| Доставка и оплата |
Корабль с сухим льдом; или при температуре окружающей среды |
| Хранилище |
● Жидкость, температура -20°C или ниже.
● Лиофилизированный порошок, при 4°C
|
| Процесс подачи заявки |
Разработка рецептуры ЛНП,
Клеточные анализы, эксперименты на животных
|
Другие настраиваемые параметры
| 5' Кэп |
● раскрытый
● Cap0, совмещенный
● Cap1, совмещенный
● Cap1, ферментативное кэпирование
|
| 5' УТР/3' УТР |
● Природная последовательность UTR
● Мутантная/инженерная последовательность UTR
|
| 3 'ПолиА Хвост |
● 100–120 А, хвостовик (рекомендуется)
● Сегментированный хвост из полиА
● Другой индивидуальный хвост
|
| Модифицированные нуклеозиды |
● Немодифицированные базы,
● Псевдоуридин (Ψ),
● N1-Метилпсевдоуридин (N1Ψ),
● 5-метилцитозин (m5C),
● 5-метилуридин (m5U),
● 5-метоксиуридин (5МОЕ),
● 2-тиуридин (s2U),
● 2'-О-метил-U
● Другое
|
Кейсы
Мы разработали процесс многоступенчатой хроматографической очистки и получили мРНК с высокой чистотой и целостностью (>95%).
Рис. Анализ мРНК высокой чистоты (>98%)
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
