In vitro transkripcijas (IVT) mRNS sagatavošanas procesā linearizēta plazmīda DNS ir nepieciešama kā IVT transkripcijas šablons ar T7 RNS polimerāzes palīdzību. Augstas kvalitātes plazmīdu DNS ir izšķiroša nozīme in vitro transkripcijā.
Pamatojoties uz nobriedušu plazmīdu sagatavošanas pakalpojumu platformu, Yaohai Bio-Pharma var piedāvāt augstas tīrības un augstas kvalitātes linearizētu plazmīdu DNS sagatavošanas pakalpojumu, lai panāktu efektīvu IVT transkripciju.
Informācija par pakalpojumiem
| Process | Izvēles pakalpojums | Informācija par pakalpojumu | Piegādes periods (darba diena) |
| Apļveida plazmīda sagatavošana | Gēnu sintēze | Gēnu sintēze (trešās puses) | 7-10 |
| Plazmīdu pastiprināšana | Plazmīdu pastiprināšana | 2 |
| Plazmīdu ekstrakcija |
| Linearizētas plazmīdas sagatavošana | Plazmīdu linearizācija un attīrīšana | Plazmīdu linearizācija | 1 |
| Linearizācijas DNS attīrīšana |
| Plazmīdu DNS kvalitātes kontrole | Koncentrācijas tīrība | Ultravioletā (UV) spektrofotometrija | 1-2 |
| Plazmīdu konformācija | Agarozes gēla elektroforēze (AGE) |
| Kapilārā elektroforēze (CE) - pēc izvēles |
| Plazmīdu identificēšana | Restrikcijas enzīmu identifikācija/ AGE |
Mūsu funkcijas
Elastīga linearizācijas metožu izvēle
- Augsts atkopšanas līmenis
DNS ekstrakcijas un attīrīšanas metožu optimizācija, lai sasniegtu augstus reģenerācijas rādītājus.
- Stingra kvalitātes kontrole
Stingri procesa kontroles standarti ar plazmīdu paraugu superspirāles konformācijas ātrumu pētniecībai, kas pārsniedz 80%.
- Nobriedušas platformas process
Augsta standarta un augstas efektivitātes plazmīdu sagatavošanas un kvalitātes kontroles pakalpojumi, lai apmierinātu eksperimentālās vajadzības.
Gadījuma izpēte
Kā piemēru ņemot Yaohai Bio-Pharma kataloga mRNA_luciferase produktu, transkripcijas šablona plazmīdas paraugam (izpētes pakāpe) superspirāles attiecība ir lielāka par 90%, linearizācijas attiecība ir tuvu 100%, un sekojošā transkripcijas attiecība ir līdz 1:200 ( linearizēta plazmīda DNS:mRNS).
mRNS_luciferāze, kas iegūta, sagatavojot linearizētu plazmīdu kā veidni, tiek transfekēta 293T šūnās, un fermenta-substrāta reakcijas aktivitāte tiek novērtēta 24 stundas pēc transfekcijas.
Var noteikt acīmredzamu spēcīgu luciferāzes aktivitātes signālu, ti, luciferāzes proteīns tiek ekspresēts efektīvi, kas liecina, ka transkripcijas šablona tīrība var pilnībā apmierināt augstas kvalitātes mRNS sagatavošanas prasību.
Supercoiled plazmīdu attiecības tests
Luciferāzes mRNS ekspresijas apstiprināšana in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
