CircRNA sagatavošanai ir nepieciešama lineāra RNS kā prekursormateriāls (RNS prekursors) ciklizācijai, kur RNS prekursoru parasti sagatavo, izmantojot linearizētu plazmīdas DNS kā transkripcijas veidni, un transkribē in vitro ar T7 RNS polimerāzes palīdzību.
Augstas kvalitātes plazmīdu DNS ir būtiska in vitro transkripcijai (IVT). Pamatojoties uz nobriedušu plazmīdu sagatavošanas pakalpojumu platformu, Yaohai Bio-Pharma var nodrošināt augstas tīrības pakāpes un standarta linearizētas plazmīdu DNS (pDNS) sagatavošanas pakalpojumu, lai nodrošinātu IVT produktu integritāti.
Informācija par pakalpojumiem
| Process | Izvēles pakalpojums | Informācija par pakalpojumu | Piegādes periods (darba diena) |
| Apļveida plazmīda sagatavošana | Gēnu sintēze | Gēnu sintēze (trešās puses) | 7-10 |
| Plazmīdu pastiprināšana | Plazmīdu pastiprināšana | 2 |
| Plazmīdu ekstrakcija |
| Linearizētas plazmīdas sagatavošana | Plazmīdu linearizācija un attīrīšana | Plazmīdu linearizācija | 1 |
| Linearizācijas DNS attīrīšana |
| Plazmīdu DNS kvalitātes kontrole | Koncentrācijas tīrība | Ultravioletā (UV) spektrofotometrija | 1-2 |
| Plazmīdu konformācija | Agarozes gēla elektroforēze (AGE) |
| Kapilārā elektroforēze (CE) - pēc izvēles |
| Plazmīdu identificēšana | Restrikcijas enzīmu identifikācija/ AGE |
Mūsu funkcijas
Elastīga linearizācijas metožu izvēle
- Augsts atkopšanas līmenis
DNS ekstrakcijas un attīrīšanas metožu optimizācija, lai sasniegtu augstus reģenerācijas rādītājus.
- Stingra kvalitātes kontrole
Stingri procesa kontroles standarti ar plazmīdu paraugu superspirāles konformācijas ātrumu pētniecībai, kas pārsniedz 80%.
- Nobriedušas platformas process
Augsta standarta un augstas efektivitātes plazmīdu sagatavošanas un kvalitātes kontroles pakalpojumi, lai apmierinātu eksperimentālās vajadzības.
Gadījuma izpēte
Par piemēru ņemot Yaohai Bio-Pharma produktu mCherry circRNA, transkripcijas šablona plazmīdu paraugu superspirālā attiecība (pētījuma pakāpe) ir vairāk nekā 70%, un linearizācijas līmenis ir gandrīz 100%.
mCherry cirRNS tiek sagatavota ar linearizētu plazmīdu kā veidni un transfekēta 293T šūnās. Augsts fluorescences ekspresijas līmenis (sarkanā fluorescence) tiek konstatēts pēc 24 stundām pēc transfekcijas, kas tiks pastiprināts pēc 48 stundām, un to joprojām var noteikt 7. un 14. dienā pēc transfekcijas.
mCherry proteīns ir stabili un efektīvi ekspresēts, un transkripcijas veidnes tīrība var atbilst augstas kvalitātes cirRNS zāļu produkta (DP) prasībām.
mCherry cirRNS in vitro ekspresijas validācija
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
